玉米赤霉烯酮是由鐮刀菌屬真菌產(chǎn)生的非甾體類雌激素霉菌毒素,可長期存在于被污染的谷物制成的食物和飼料中,對人類具有致癌作用和生殖毒性。重組抗體生產(chǎn)的長期成本較低,可用于各種生物傳感器形式,因此具有補充和替代雜交瘤技術(shù)的潛力。噬菌體展示技術(shù)是選擇高親和力抗體的有力工具之一,通過分子進化方法獲得所需的特異性,已被*為是一種有價值的抗體生成替代方法。
本抗體為鼠抗玉米赤霉烯酮單克隆抗體,該抗體可運用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測。
為建立快速、簡單、靈敏、有效的玉米赤霉烯酮的檢測方法,將玉米赤霉烯酮與羧甲氧基胺半鹽酸鹽反應(yīng),合成半抗原,通過活潑酯法將半抗原與載體蛋白偶聯(lián)制備玉米赤霉烯酮人工抗原,經(jīng)篩選和克隆,得到了1株能穩(wěn)定分泌抗玉米赤霉烯酮抗體的單克隆細胞株。該單克隆抗體的抗體類型及亞類均為,其輕鏈為Kappa鏈。制備的單克隆抗體腹水通過間接酶聯(lián)免疫吸附測定。該單克隆抗體對玉米赤霉烯酮,除與玉米赤霉烯酮結(jié)構(gòu)類似物有一定的交叉反應(yīng)外,與其他參試真菌毒素均無交叉反應(yīng)。所制備的單克隆抗體可用于玉米赤霉烯酮毒素初篩和定性檢測。
鼠抗玉米赤霉烯酮單克隆抗體的創(chuàng)新點:
采用鼠抗玉米赤霉烯酮單克隆抗體,基于競爭反應(yīng)模式,通過對金顆粒尺寸、免疫層析相關(guān)組成材料及緩沖液配方的系列優(yōu)化,同時借助手持式信號讀取裝備,實現(xiàn)對谷物和飼料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同時定量檢測。該方法簡單、快速且成本低,與液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)一致性良好,便于基層單位的推廣使用。
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