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CellWorld無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液如何使用?

閱讀:205      發(fā)布時(shí)間:2025-5-15
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 CellWorld無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液的使用方法如下:
凍存管凍存步驟
1.收集細(xì)胞:按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于離心管中。貼壁細(xì)胞需先用胰酶等消化液消化使其脫離培養(yǎng)瓶壁,然后收集;懸浮細(xì)胞可直接收集。
2.計(jì)算細(xì)胞數(shù):按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù),一般細(xì)胞密度為(5×10^{5}-5×10^{6}cells/ml)。
3.離心收集細(xì)胞:取所需數(shù)量的細(xì)胞懸浮液于離心管中,以(1000-2000rpm),在(4℃)下離心(3-5)分鐘,離心后移去離心管中的上清液,留下細(xì)胞沉淀。
4.重懸細(xì)胞:加入適量的CellWorld無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度達(dá)到(5×10^{5}-5×10^{6}cells/ml),緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。
5.分裝細(xì)胞:將細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記好的冷凍管中,標(biāo)記內(nèi)容包括細(xì)胞名稱(chēng)、凍存日期等重要信息。
6.凍存細(xì)胞:將凍存管直接放入(-80℃)冰箱,可長(zhǎng)期冷凍保存。若需要液氮保存,第二天可將凍存細(xì)胞從(-80℃)冰箱轉(zhuǎn)移至(-196℃)液氮罐中。
細(xì)胞培養(yǎng)板原位凍存步驟
1.吸棄上清:從培養(yǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。
2.加入凍存液:加入適量CellWorld無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,要充分浸潤(rùn)細(xì)胞。
3.密封培養(yǎng)板:蓋上蓋板,做好密封措施,防止染菌。
4.凍存培養(yǎng)板:直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入(-80℃)以下冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存。

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