MEM EARLES 含L-谷氨酰胺培養(yǎng)基基本成分和保存

無機鹽；培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細胞調節(jié)細胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細胞通?？赡褪?60mOsm/kg ～320 mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時需按以下方法調節(jié)鈉離子濃度。

緩沖系統(tǒng)；大多數細胞所需pH值 在 7.2 - 7.4。但是，細胞培養(yǎng)zui適pH 值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH值 (7.4 - 7.7), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH 值(7.0 - 7.4)。
由于多數培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2 體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2 濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L；如果CO2 濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L。
細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 - 7.4 范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH 指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

碳水化合物；碳水化合物是細胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

維生素；在細胞培養(yǎng)中，盡管血清是維生素重要來源，但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。

液體培養(yǎng)基；應于4℃冰箱避光保存，實驗前放入37℃預熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12 個月。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細胞生長不良，可以再添加適量L-谷氨酰胺。
干粉培養(yǎng)基保存：
4℃冰箱避光保存，有效期36 個月。

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