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技術(shù)文章

抗血清制備必須注意的問題

閱讀:2868          發(fā)布時間:2018-9-4

  九月,穿過留在夏季的所有溫度。在窗欞上刻畫成一朵霧花,留下些許在心底的不舍。讓記憶在筆尖流逝。美好的九月開始了,下面滬鼎生物與您嘮嘮抗血清制備必須注意的問題,了解他對您有益無害哦!
  抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價(jià)的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。
  一種抗原能否引起抗體反應(yīng),一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenic 
determinant),另一方面取決于機(jī)體的免疫狀態(tài),當(dāng)具備以上兩個條件后,抗體將遵循抗體的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)。
  抗原的種類繁多,包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細(xì)胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般*抗原免疫動物需加用佐劑,尤其在使用可溶性抗原時,以期得到價(jià)的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質(zhì)需先通過人工的方法與蛋白質(zhì)載體連接后再與佐劑混合免疫動物,方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機(jī)體內(nèi)存留的時間,從而改變了抗原原有的免疫原性。
其注意事項(xiàng)有如下幾點(diǎn): 
  1、動物的免疫反應(yīng)存在著個體差異,甚至有人報(bào)告不同品種動物一次免疫后產(chǎn)生的抗體的差別可高達(dá)500倍,所以制備抗血清時不能只免疫一只動物,一般免疫3~4只,因?yàn)橛械膭游锟赡墚a(chǎn)生抗體效價(jià)很低或不產(chǎn)生抗體,免疫反應(yīng)好的動物所能提供的抗體往往高于一般動物3~4倍。
  2、制成的抗原乳劑是否為油包水乳劑應(yīng)進(jìn)行檢查,否則會影響免疫效果,如不是油包水乳劑,應(yīng)重新制備。
  3、要制備價(jià)的抗體,必須要加佐劑(一般采用*福氏佐劑),加佐劑后免疫動物,抗體效價(jià)至少可增加5倍。但也應(yīng)考慮到,如果抗原中有微量的雜蛋白存在,即使0.005mg,亦可因有佐劑而產(chǎn)生非特異性的抗體,所以要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要和抗原的純度適當(dāng)?shù)厥褂米魟?br />  4、分裝保存的抗血清應(yīng)注明抗血清的名稱,效價(jià),制備日期以及包裝量。
  5、當(dāng)抗原量過少不易提純時,可采用抗原抗體在瓊脂擴(kuò)散中形成的沉淀線直接免疫動物制備抗體。
  6、抗血清效價(jià)一般以抗血清稀釋倍數(shù)表示。血清效價(jià)的檢測方法很多,靈敏度各不同,因此在表示抗血清效價(jià)時,應(yīng)標(biāo)明檢測方法。另外,在沉淀反應(yīng)中,出現(xiàn)沉淀時的抗原、抗體比例有一較大的范圍,如用不同濃度的抗原測定效價(jià)時,結(jié)果會因此有別,所以在測定抗血清效價(jià)時,需注意抗原的濃度。
  7、為制備單價(jià)特異性高的抗血清,所用抗原純度越高越好,因此,在純化抗原過程中應(yīng)盡量除去可能存在的雜蛋白,這樣可以省去許多時間來吸收抗血清中的非特異性抗體。 
  上海滬鼎主營范圍:ELISA試劑盒,生物試劑,細(xì)胞培養(yǎng),血清,免疫組化抗體,一抗,二抗,單克隆和多克隆抗體等一系列供學(xué)校、醫(yī)院、研究所等單位科研實(shí)驗(yàn)用的科研產(chǎn)品,我公司屬于國內(nèi)合資企業(yè),ELISA試劑盒也是生命科學(xué)試劑的運(yùn)營商,本公司專業(yè)代理國內(nèi)外生命科學(xué)試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍涉及細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué),免疫學(xué)及生物化學(xué)等實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究試劑,歡迎您的咨詢與訂購。

                          

 

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