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培養(yǎng)細胞過程中出現的問題
閱讀:961 發(fā)布時間:2018-12-18冬天,一層薄薄的白雪,像巨大的輕軟的羊毛毯子,覆蓋摘在這廣漠的荒原上,閃著寒冷的銀光。天寒地凍,在培養(yǎng)細胞的過程中,或許您會有一系列的問題想要問。今天滬鼎生物為大家整理了一些關于細胞的常見問題解答。
1.細胞成長曲線測守時為什么要做重復孔?
答:測定細胞成長曲線細胞計數時挑選3個復孔,每孔分別計三次,取其平均值,目的是減小操作差錯。
2.為什么制作的細胞成長曲線沒有到達平臺期?
答:可能有以下原因:一是細胞接種密度過低;二是細胞培育時刻過短;三是細胞成長狀況欠好,使其不能正常增殖。
3. 怎么挑選細胞接種數?
答:可根據細胞傳代培育過程中接種數及細胞成長周期進行核算,細胞接種數因細胞的不同而不同。
4.細胞計數時為什么要用臺盼藍染色?
答:參加臺盼藍后,活細胞不上色,臺盼藍上色的細胞呈深藍色,是不健康或已逝shi的細胞,不能計數。
5.測定細胞成長曲線的含義是什么?
答:細胞成長曲線是測定細胞肯定成長數的常用辦法,也是斷定細胞生機的重要目標,是培育細胞生物學特性的基本參數之一。由于細胞太小,無法測單個細胞的成長狀況,所以測細胞集體的成長曲線。
6.細胞成長曲線測定周期是幾天?
答:一般是一個星期。
7.細胞成長曲線還有其他辦法制作嗎?
答:當然有。我們說到zui多的是直接計數的辦法,除此以外還有相對計數的辦法,該類辦法首先要制作規(guī)范曲線,標定細胞數和某個變量的函數,然后我們只需要測定每天這個變量的值便能夠核算出細胞數。常用的是 MTT、CCK8 等比色的辦法。
8.為什么細胞計數多天,細胞數沒有添加反而削減?
答:一般細胞傳代后,會有一個成長緩慢的潛伏期,細胞不增殖,而細胞會有正常的逝shi,故細胞數不添加反而削減。
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