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技術(shù)文章

大鼠白細胞介素4(IL-4)elisa試劑盒備受青睞

閱讀:743          發(fā)布時間:2022-7-8

近期大鼠白細胞介素4(IL-4)elisa檢測試劑盒備受青睞并且能夠持續(xù)熱賣,這其中的原因你們知道嗎?

下面給大家分享一下它的具體操作原理:

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。


2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。


7. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


8. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10-20分鐘。


10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。


11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。


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