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elisa試劑盒操作步驟(新手適用)
閱讀:2530 發(fā)布時間:2013-5-2elisa試劑盒操作步驟(新手適用)
1. 加標準品:在酶標包被板上設(shè)標準品孔,ELISA試劑盒 依次加入不同濃度的標準品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)人ELISA試劑盒。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。大鼠ELISA試劑盒在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻小鼠ELISA試劑盒。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘ELISA試劑盒。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,大鼠ELISA試劑盒每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干小鼠ELISA試劑盒。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外ELISA試劑盒。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘人ELISA試劑盒.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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