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制備/鑒定標準品具體方法說明
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·標準物純品的選擇
應選擇高化學純和高免疫純的純品作標準品。其中免疫純尤為重要,在標準品中不應含有與被測物質有交叉反應的物質。
·標準品的制備
先用零值血清配置高濃度的標準品,然后根據(jù)實驗系統(tǒng)的要求,用零值血清將高值血清稀釋至應有的濃度,制成符合預定要求的,由不同濃度組成的系列標準品。
·鑒定
1、免疫活性的鑒定
選用高特異性的抗血清分別作*標準品的待鑒定標準品的劑量反應曲線,并觀察兩條曲線的平行性。如兩條劑量反應曲線平行,說明兩種物質對同一抗體有相同的親和力,即二者是同質性物質。如兩條劑量反應曲線不平行,說明兩種物質具有異質性,因而這一待鑒定的標準品是不能使用的。
2、濃度的標定
已鑒定過的,免疫活性合格的標準品,與*的標準品作濃度相同的劑量反應曲線。此時,兩條劑量反應曲線應該是基本重合的。如果兩者平行但不重合,則取兩條劑量反應曲線的50%結合處的相應劑量計算二者的換算系數(shù),然后調整待鑒定標準品的濃度,直至使兩條劑量反應曲線*或基本重合為止。
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