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上海滬鼎全面解析重復(fù)性差的原因
閱讀:1100 發(fā)布時(shí)間:2015-11-3在elisa實(shí)驗(yàn)中新手朋友由于各種的原因重復(fù)性會(huì)差,上海滬鼎的錢為您詳細(xì)整理了重復(fù)性差的9大因素:
1、樣品數(shù)量不一,加樣時(shí)間長短不一 | 重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近 |
2、樣品加入后未混勻 | 加樣后在混勻器上充分混勻 |
3、酶標(biāo)儀濾光片不對(duì)或輸入波長不對(duì) | TMB顯色用450/630波長 |
4、酶標(biāo)儀測(cè)定重復(fù)性差 | 校對(duì)酶標(biāo)儀 |
5、洗滌不正確 | 洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時(shí)反應(yīng)板面向下,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機(jī)洗板時(shí)不應(yīng)有堵孔,洗滌應(yīng)充分 |
6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱) | 恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃ |
7、不慎多加或少加酶或顯色劑 | 多加時(shí)顯色深,少加則淺,用記號(hào)筆圈上,便于分析 |
8、閾值附近時(shí)陰時(shí)陽 | 同一樣品做三個(gè)復(fù)孔,以二個(gè)(含二個(gè)以上相同結(jié)果為準(zhǔn)) |
9、加樣量不足、保溫時(shí)間、洗滌條件一致 | 盡可能使用同一移液器和裝緊吸嘴重復(fù)測(cè)定標(biāo)本。條件、人員等應(yīng)盡量與上次保持一致 |
希望經(jīng)過以上的分析能使您避開這些問題,能成功的做出的實(shí)驗(yàn)!