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雙抗體夾心法實(shí)驗(yàn)報(bào)告為何要設(shè)計(jì)空白組和陰性對(duì)照組
閱讀:5926 發(fā)布時(shí)間:2015-11-26 雙抗體夾心法是用特異性抗體包被于固相載體,經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測(cè)樣品,如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合,經(jīng)保溫孵育洗滌后,即可加入酶標(biāo)記特異性抗體,再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色進(jìn)行測(cè)定,底物降解的量即為欲測(cè)抗原的量。
這種方法欲測(cè)的抗原必須有兩個(gè)可以與抗體結(jié)合的部位,因?yàn)槠湟欢艘挥诠滔噍d體上的抗體作用,而另一端則要與酶標(biāo)記特異性抗體作用。因此,不能用于分子量小于5000的半抗原之類的抗原測(cè)定。我們用在霍亂腸毒素的測(cè)定。HbSAg及HbS的測(cè)定。
在昨天上午上班沒多久錢在“在線”上看到了這樣一個(gè)問題:雙抗體夾心法實(shí)驗(yàn)報(bào)告為什么要設(shè)計(jì)空白組和陰性對(duì)照組?錢馬上為這位客戶解決了這個(gè)問題:
設(shè)計(jì)空白組和陰性對(duì)照組是為了保證通過雙抗夾心法檢測(cè)到的信號(hào)確實(shí)是來自于目標(biāo)目標(biāo)蛋白。
空白組,只加緩沖液,看板子或者是液體有沒有引入背景,如果有一些,可以用樣品信號(hào)值減去空白組的值,算出具體的信號(hào)值。
陰性對(duì)照,則是不加樣品,其他都和樣品組一樣,這樣的話,如果有信號(hào),肯定是非特異反應(yīng)引起的。
有了這些對(duì)照就可以看出來樣品的檢測(cè)是否正確了。
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