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技術(shù)文章

ELISA檢測試劑盒原理和局限性分析

閱讀:1345          發(fā)布時間:2013-8-5
ELISA檢測試劑盒原理和局限性

ELISA檢測試劑盒原理

   酶聯(lián)免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留。將標(biāo)準(zhǔn)、樣品提取物和三聚氰胺酶標(biāo)記物添加到現(xiàn)已包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)。在30分鐘的培養(yǎng)過程中,樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標(biāo)記物競爭結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體,培養(yǎng)30分鐘后洗掉微孔中所有沒有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標(biāo)記物。在用稀釋的洗液清潔完畢后,每孔中添加清澈的底物溶液,結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍色的物質(zhì)。培養(yǎng)20分鐘后中止此反應(yīng),根據(jù)各孔色彩深淺進行數(shù)據(jù)讀取。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的色彩得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。
ELISA檢測試劑盒局限性
 
ELISA檢測試劑盒的發(fā)現(xiàn)

   我們現(xiàn)已對能夠呈現(xiàn)在檢測樣品中的許多有機和無機物做了檢測,發(fā)現(xiàn)它們不與這個試劑盒產(chǎn)生交叉反應(yīng)。然而在樣品中也含有一些容易變質(zhì)的化合物,它們通過基質(zhì)影響來攪擾測定,如含脂肪的食物,它們在測定前要經(jīng)過稀釋來消除一些基質(zhì)對實驗結(jié)果的影響。在運用的過程中呈現(xiàn)失誤也會影響成果,例如試劑盒存儲的條件、汲取液體的程序、汲取液體的不、在產(chǎn)生免疫和底物反應(yīng)的過程中培養(yǎng)時間不。
 

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