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端粒酶活性TRAP 實時定量檢測試劑盒產品說明書
閱讀:4211 發(fā)布時間:2016-7-27主要用途
我公司端粒酶活性TRAP 實時定量檢測試劑是一種旨在運用SYBR 綠色熒光染料作為標記信號,結合端粒重復序列擴增方法(TRAP),既方便、快速地進行各種DNA 模板的擴增,又實時檢測和定量分析擴增產物,即端粒酶活性的而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應用于腫 瘤、衰老等研究。產品即到即用,性能穩(wěn)定,無核酶污染,操作便捷,敏感,定量準確,重復性強,效果滿意,質量保證。
注意事項
1. 本產品為20 次PCR 反應
2. 操作時,須戴手套
3. 本產品適合各種熒光定量PCR 儀
4. 建議整個操作在4℃下進行
5. 必須使用帶濾芯的槍頭
6. 所有器皿、離心管、液體等無RNA 酶污染
7. 使用時,避免污染母液
8. 建議使用裂解液或無離子水作為陰性對照
9. 根據(jù)用戶PCR 儀的性能,決定是否加入封隔液(Reagent E)
10. 配制完成后,即刻進行擴增反應,以確保反應物的活性
11. 試劑避免反復凍融
12. 通常樣品量范圍為1.6 納克至1 微克;理想范圍為250 納克;如果沒有反應,可能樣品中存在PCR 抑制劑,建議調整樣品量為100 至200 納克
13. PCR 擴增反應的初3 個循環(huán)為定量基線;3 至15 個循環(huán)的熒光信號的10 倍值為熒光閾值;熒光信號達到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct 值(參考圖像如下):其中6 號為陰性對照
14. Ct 值作為端粒酶活性的計量單位
15. 用戶可以使用293 細胞(10,100,和1000 細胞數(shù))作為陽性對照,以此建立標準曲線:橫座標(X軸)為細胞量對數(shù),縱座標(Y 軸)為Ct 值
16. 如果檢測卵細胞樣品,建議平均每個卵細胞使用5 微升裂解液(Reagent A)裂解細胞,孵育60 分鐘,取1/10 至1/20 的卵細胞量,進行定量擴增反應
本公司提供系列端粒酶活性檢測試劑產品
如:
端粒酶活性TRAP實時定量檢測試劑盒