我們干的研究工作大部分是基因治療，抽提質(zhì)粒是一件相當(dāng)痛苦的事。因?yàn)?/span>需要做動(dòng)物的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，您需要靜脈注射50微克

質(zhì)粒抽提試劑盒的動(dòng)物，三次重復(fù)注射，每次150毫克，如果有60只需要9。如果需要大量抽提質(zhì)粒的實(shí)驗(yàn)人員就清楚這是需要多大的工作量并且需要提出的是靜脈注射動(dòng)物用的質(zhì)粒是需要去內(nèi)毒素的，目前去內(nèi)毒素得率高的非哈靈生物莫屬。

要有高產(chǎn)率高質(zhì)量的質(zhì)粒抽提試劑盒，以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)要注意：

1. 準(zhǔn)備必要的設(shè)備，根據(jù)哈靈生物的協(xié)議，連接到的廣口瓶，直徑45毫米，這是因?yàn)楸仨毰c瓶可以匹配，操作的真空過(guò)濾這一步可以迅速和容易，減少不必要的麻煩。

2. 高拷貝質(zhì)粒是的，主管細(xì)菌是的高拷貝。作為10大，DH5α稍差。主管細(xì)菌是剛做不久。

3. 每次在600毫升細(xì)菌數(shù)量，LB注意水質(zhì)量一定要好，一定的pH值在7.27.4，搖床轉(zhuǎn)速250轉(zhuǎn)/分，16小時(shí)，注意其濃度必須堅(jiān)強(qiáng)。

4. 操作過(guò)程必須與時(shí)間的指示一致，嚴(yán)格操作。要注意一點(diǎn)：添加中和在的時(shí)間較短，因此需要真空，快速進(jìn)入下一步。

5.洗脫時(shí)間很長(zhǎng)，要有耐心，不要讓臟兮兮的洗脫液停止。

6.異丙醇沉淀DNA離心在20000轉(zhuǎn)離心45分鐘，可以提高20%的產(chǎn)量。

7.是圓底離心管和透明，以免離心破裂，而且操作方便。

8.在一定要提前質(zhì)粒沉淀在棄異丙醇和乙醇一般位置，不誘導(dǎo)質(zhì)粒被遺棄了。

9.溶解DNA注意溶液的體積比在手冊(cè)的說(shuō)明略小，佳二次溶解，然后混合。

相信注意這些細(xì)節(jié)后，你將獲得每一次以上1.5mg質(zhì)粒。