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TIRF、共聚焦、FRET、光活化和顯微注射技術幫助科學家們克服了許多活細胞成像中的困難。所有技術的核心就是Ti，擁有這款強有力的新型倒置顯微鏡，您可以在尼康CFI60®光學系統(tǒng)的幫助下輕松使用上述技術。Ti系列共有三種型號，改進的系統(tǒng)速度，提升的靈活性和高效多模式特點使Ti成為用于研究和活細胞成像的理想系統(tǒng)。

用于生物科學研究領域的新型倒置顯微鏡系列

| 自動焦點校正系統(tǒng)實現(xiàn)穩(wěn)定時間序列成像

Ti-E具備尼康*的*對焦系統(tǒng)（PFS，Perfect Focus System），此系統(tǒng)具備在長時間時間序列成像過程中實時自動校正焦點漂移的功能。無論是由于溫度變化還是外部機械震動而引起的焦點漂移都可*校正。此系統(tǒng)同時具備自動確認焦點的實用功能。

PFS原理示意

下圖中為使用油鏡時的原理示意圖。此系統(tǒng)通過紅外激光確定玻片與液體的交界面，以此為參照進行焦點校正。并通過Offset透鏡調(diào)整焦點與參照面間的距離差距。（此系統(tǒng)亦可用于干式物鏡，并可兼容玻璃與塑料培養(yǎng)裝置）

更多信息請參考“第三代*對焦系統(tǒng)”。

| 高速電動控制與拍攝

同步高速控制若干電動部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺，研究者可以進行多維電動實驗。更快的附件運動和圖像獲取縮短整體的曝光時間，減少相應的光毒性，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù)。使用者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復制觀察條件，實現(xiàn)用鼠標控制載物臺，整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。

HeLa細胞瞬時表達Venus-tubulin與mCherry-actin并使用Hoechst33342與DiD標記，多點快速拍照（圖像為偽色）。

Photos courtesy of: Kenta Saito and Takeharu Nagai, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido University

| 可使用高數(shù)值孔徑物鏡的高質(zhì)量相差

尼康世界的光學設計者開發(fā)了*的外部相差單元。使用這一革新系統(tǒng)，將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里，使用者不必使用相差物鏡來觀察相差圖像，并可以通過高數(shù)值孔徑物鏡來得到高質(zhì)量圖像。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到“全亮度”的熒光圖像。

置于顯微鏡主體內(nèi)的相差環(huán)

將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設計，便于使用者使用高數(shù)值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像。根據(jù)所使用的物鏡，有四種類型的相差環(huán)可供選擇（Ti-E/U/S通用）。

超高分辨率相差圖像

使用尼康的高性能物鏡，包括60x和100xTIRF物鏡，具有世界zui高1.49的數(shù)值孔徑，并且整合球差校正環(huán)，可以得到其它標準相差物鏡*的高分辨率相差圖像。

相差落射熒光 TIRF

NG108細胞：生長錐標記EGFP-fascin。
Photos courtesy of: Satoe Ebihara, Kaoru Katoh, The National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST）

使用同款物鏡得到的“全亮度”熒光圖像由于沒有相差環(huán)導致的光線損失，在同一系統(tǒng)中，不僅可以進行相差觀察，還可以得到更明亮的“全亮度”熒光圖像、共聚焦圖像和TIRF圖像。

C. elegans: Touch neurons stained with EGFP

Photos courtesy of: Motomichi Doi and Kaoru Katoh, The National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST)

用水浸物鏡來觀察相差圖像

通過外部相差單元，即使使用水浸物鏡也可以得到清晰、高分辨率的相差圖像。

用于圖像分析的高分辨率圖像

由于相差圖像與TIRF觀察、DIC觀察可以使用同樣的物鏡，得到的圖像可用于高精確性數(shù)據(jù)處理和圖像分析，例如TIRF圖像的細胞輪廓定義。

| 多層擴展設計多端口支持

具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設計可以在每個端口連接一個相機。另外分層結(jié)構(gòu)的擴展空間設計可以加入一個后端口，這些特點方便用戶使用雙層熒光濾色塊盒和多相機進行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口。

后端口確保多相機拍攝

使用可選的后端口設計擴展了圖像獲取能力。與側(cè)端口結(jié)合使用可以用兩個相機獲取雙通道圖像。例如當FRET (福斯特共振能量轉(zhuǎn)移)的熒光蛋白之間有觀察間隔、CFP和YFP的強度差別很大時，可以通過調(diào)節(jié)單個相機的靈敏度來得到高信噪比圖像進行比較。

分層結(jié)構(gòu)提高可擴展性

Ti采用的分層結(jié)構(gòu)充分利用了無限遠光學系統(tǒng)的優(yōu)勢，另外將PFS整合到物鏡轉(zhuǎn)換器?？梢酝ㄟ^墊高塊在光路中引入PFS之外的兩個可選部件，利用該系統(tǒng)可以同時使用激光鑷、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動熒光濾色塊盒可以單獨控制。

| 精準與快速的電動控制

非凡的快速圖像獲取

對96孔板進行三通道（雙通道熒光和相差）快速拍攝，速度提高2倍以上。

數(shù)字控制集線器顯著提升了電動附件的速度

尼康研發(fā)的數(shù)字控制集線器通過減少部件之間的通訊時間，提高各附件的速度，進而顯著提高整體的操作速度。 PC控制對Ti的電動部件進行優(yōu)化，縮短從動作命令到移動之間的反應時間，從而對整體施行高速控制。通過增加智能固件，電動部件的整體操作時間顯著縮短，例如三通道（雙通道熒光和相差）連續(xù)圖像獲取需要的總時間大大縮短，減少了對細胞的光毒性。

高速電動控制與圖像獲取

同步控制若干電動部件，諸如物鏡轉(zhuǎn)換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺，研究者可以進行多維電動實驗。更快的附件運動和圖像獲取縮短整體的曝光時間，減少相應的光毒性，幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù)。

提升每個電動部件的速度

操作和/或轉(zhuǎn)換物鏡、濾光塊、XY載物臺、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加，研究者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復制觀察條件，實現(xiàn)用鼠標控制載物臺，整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。

| 各種光學技術的*圖像

尼康優(yōu)化的光學技術提供多種模式觀察標本，向研究者呈現(xiàn)細胞的每一個細節(jié)。

Nomarski 微分干涉（DIC）

高對比度和高分辨率的平衡對于觀察細微結(jié)構(gòu)至關重要。尼康*的DIC系統(tǒng)即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像。新型DIC滑塊（干）提供高分辨率和高對比度兩種選擇。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動濾光塊盒內(nèi)，將DIC觀察和熒光觀察的切換時間顯著縮短。

相差

相差圖像觀察時可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。該物鏡與傳統(tǒng)相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈，增強了圖像的對比度。

暗場

使用高NA的聚光鏡可以進行暗場觀察?？梢詫ξ⒘Ｗ舆M行長時間的觀察，并避免光漂白。