預(yù)混or非預(yù)混，RNA建庫試劑盒，你pick哪個(gè)呢？

RNA測序，又稱為轉(zhuǎn)錄組測序，是高通量測序中應(yīng)用非常廣泛的組學(xué)技術(shù)之一。其研究應(yīng)用有：

不同處理組差異基因表達(dá)分析；
mRNA表達(dá)量的差異研究；
mRNA結(jié)構(gòu)上的差異（可變剪接、融合基因、點(diǎn)突變（SNP）。

RNA測序?qū)嶒?yàn)流程如下：

目前，翌圣生物RNA建庫試劑盒不斷進(jìn)行升級，試劑盒越來越便捷，快速。

圖.翌圣生物RNA建庫試劑盒進(jìn)化軸

目前，RNA建庫試劑盒已經(jīng)進(jìn)化到預(yù)混版建庫試劑盒，試劑組分已經(jīng)簡化，每步操作只加一次試劑即可進(jìn)行PCR。

圖.非預(yù)混和預(yù)混版建庫試劑盒組分對比

預(yù)混版建庫試劑盒，在操作上節(jié)省人力時(shí)間，而且單次樣本越多，效果越明顯。

本次對比的試劑盒為翌圣非預(yù)混版建庫試劑盒（12308）和預(yù)混版建庫試劑盒（12310）進(jìn)行操作比對，實(shí)驗(yàn)室，使用8個(gè)樣本進(jìn)行mRNA建庫。

圖.實(shí)驗(yàn)對比（12308ES VS 12310ES）

#操作詳解

1st cDNA合成

該步驟對片段化后的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，預(yù)混版RNA建庫，只需要將1st模塊試劑加入片段化后的RNA即可進(jìn)行PCR，而非預(yù)混RNA建庫試劑盒，需要分開添加1st逆轉(zhuǎn)錄酶和1st逆轉(zhuǎn)錄酶buffer。

2nd合成步驟

該步驟承接1st cDNA合成步驟進(jìn)行二鏈互補(bǔ)鏈合成以及末修、加A等步驟。預(yù)混版RNA建庫試劑盒，只需要將完成1st cDNA PCR步驟的試劑拿出，直接加入2nd 合成試劑即可進(jìn)行下步PCR操作，而非預(yù)混RNA建庫試劑盒，需要分開添加2nd合成buffer和酶。

接頭連接步驟

該步驟承接2nd二鏈合成步驟，進(jìn)行后續(xù)接頭連接。預(yù)混版RNA建庫試劑盒，只需要加入接頭連接模塊和接頭，即可進(jìn)行接頭PCR過程，而非預(yù)混版RNA建庫試劑盒，需要分開添加連接酶、連接buffer以及接頭。

后續(xù)PCR擴(kuò)增和文庫分選、文庫定量等步驟，操作流程類型，此處不再進(jìn)行贅述。整體看來，預(yù)混版RNA建庫試劑盒，不論是操作時(shí)間，還是操作的便捷度上，都有非常大的優(yōu)勢。尤其是在自動(dòng)化建庫時(shí)，這種便捷度，能大大提高自動(dòng)化效率。

心動(dòng)了嗎？聯(lián)系翌圣體驗(yàn)預(yù)混版建庫試劑盒的樂趣吧！