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參考價: | ¥ 393 |
訂貨量: | 1 件 |
- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):475更新時間:2023-02-22 16:39:27
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100 U |
---|---|---|---|
貨號 | 10144ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 使用含dUTP的引物進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增 |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號
規(guī)格
價格(元)
Hieff Canace® II Uracil DNA Polymerase
10144ES60
100 U
393.00
10144ES76
500 U
1993.00
產(chǎn)品描述Hieff Canace® II Uracil DNA Polymerase是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升,針對復(fù)雜的模板也能快速準(zhǔn)確的完成PCR反應(yīng)。其保真性是Taq DNA Polymerase的52倍,是Pfu DNA Polymerase的6倍,且*克服了常規(guī)高保真酶無法以dUTP為原料進(jìn)行聚合反應(yīng)、無法使用含有dUTP的擴(kuò)增引物以及無法使用含有dUTP的DNA作為擴(kuò)增模板等諸多弊病。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化后的酶緩沖液,添加了PCR增強(qiáng)組分,使得該酶具有*的擴(kuò)增效率和廣泛的模板適應(yīng)性,非常適合復(fù)雜模板的擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端。
產(chǎn)品組分編號
組分
規(guī)格
10144ES60(100U)
10144ES76(500U)
10144-A
Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA Polymerase(1 U/μL)
100 μL
500 μL
10144-B
2×Canace® II Uracil PCR buffer(含Mg2+,dNTPs)
1 mL×3
1 mL×15
運(yùn)輸和保存方法冰袋運(yùn)輸。
-20℃保存。有效期一年。
產(chǎn)品應(yīng)用使用含dUTP的引物進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增
使用含dUTP的模板進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增
使用含dUTP的dNTP進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增
注意事項1) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
2) 本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase與常規(guī)高保真酶的使用方法略有不同。在使用前,請務(wù)必仔細(xì)閱讀使用說明。
1. 推薦反應(yīng)體系所有操作應(yīng)于冰上進(jìn)行,2×Canace® II Uracil PCR buffer解凍后請充分混勻。體系配置之前請預(yù)熱PCR儀,各組分添加完成之后用移液器吸打充分混勻并短暫離心至管底,然后置于預(yù)熱的PCR儀中進(jìn)行反應(yīng)。所有組份使用完畢之后及時放回-20℃保存。
表1 PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系組分
體積
模板或接頭連接產(chǎn)物
X µL
2×Canace® II Uracil PCR buffer
25 µL
正向引物 (10-25 μM)
1-2.5 µL
反向引物 (10-25 μM)
1-2.5 µL
Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase(1 U/µL)
1 µL
ddH2O
Total to 50 µL
【注】:
1)試劑使用:使用前要充分解凍混勻。
2)模板:使用純化后的高質(zhì)量DNA模板可以顯著提高擴(kuò)增效率和成功率;
3)dNTP:推薦dNTP使用終濃度為200 μM。試劑盒中提供的dNTP中不含dUTP,如特殊情況下需要制備含dUTP的模板,可自行額外添加dUTP至終濃度為400 μM。
4)聚合酶濃度:推薦使用1 U/50 μL??梢栽?.5-2 U/50 μL之間進(jìn)行優(yōu)化,請勿超過2 U/50 μL。為了防止聚合酶因3’→5’外切酶活性降解引物,建議將聚合酶在最后一步加到反應(yīng)體系中。5)Mg2+終濃度:體系終濃度為2 mM。如有特殊需要,可向我公司咨詢,要求提供低Mg2+濃度或不含Mg2+的buffer。
2.推薦反應(yīng)程序表2 PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序
步驟
溫度
時間
循環(huán)數(shù)
預(yù)變性
98°C
1 min
1
變性
98°C
10 sec
1~15(根據(jù)實(shí)驗要求)
退火
60°C
30 sec
延伸
72°C
30 sec
終延伸
72°C
5 min
1
Hold
4°C
-
-
【注】:
1)預(yù)變性溫度和時間:推薦使用98℃。預(yù)變性推薦時間:質(zhì)粒DNA等簡單模板為30 sec;文庫為1 min;cDNA、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min;高GC含量模板為5-10 min;
2)退火溫度和時間:推薦使用60℃,也可根據(jù)需要,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設(shè)置為20 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時間太長可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀;
3)延伸溫度和時間:推薦使用72℃。延伸時間根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整;
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品貨號
規(guī)格
價格(元)
Hieff Canace® High-Fidelity DNA polymerase
10135ES60/76/80
100/500/1000 U
626/2356/4256
Hieff Canace® II High-Fidelity DNA polymerase
10140ES60/76
100/500 U
653/2453
HB210928