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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11148ES10 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit（加A法） A尾法miRNA第一鏈cDNA反轉錄試劑盒 | 11148ES10 | 10 T | 995.00 |
11148ES50 | 50 T | 3,985.00 |
產品描述
microRNA是一類被廣泛關注的非編碼RNA，長度為22 nt左右，對植物和動物的基因表達有著非常重要的調控作用。A尾法miRNA第一鏈cDNA反轉錄試劑盒本試劑盒采用加A尾法來進行miRNA第一鏈cDNA的反轉錄，產品中的2×Hifair® miRNA RT buffer包含了miRNA加A尾反應和逆轉錄反應的所有原料和引物，并經過精心優(yōu)化，可保證miRNA 3'末端的Poly(A)修飾過程和逆轉錄過程同時高效進行。
本產品推薦與本公司的Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（Cat#11171）配套使用，以獲得*的實驗結果。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品規(guī)格 | |
11148ES10(10 T) | 11148ES50(50 T) | ||
11148-A | Hifair® miRNA RT enzyme mix | 17.5 μL | 87.5 μL |
11148-B | 2×Hifair® miRNA RT buffer | 50 μL | 2.5 mL |
11148-C | RNase-free H2O | 2 mL | 100 mL |
11148-D | Universal Reverse Primer (10 μM) | 40 μL | 2 mL |
11148-E | U6 Forward Primer (10 μM) | 40 μL | 200 μL |
11148-F | U6 Reverse Primer (10 μM) | 40 μL | 200 μL |
運輸與保存方式
操作步驟
一、體系配制
室溫融化Hifair® miRNA RT enzyme mix和2×Hifair® miRNA RT buffer后輕微顛倒混勻，置于冰上并按下表配置反應體系：
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hifair® miRNA RT buffer | 5 | 1× |
Hifair® miRNA RT enzyme mix | 1.75 | - |
RNA* | - | X |
RNase-free H2O | Up to 10 | - |
*總RNA及提取的miRNA的濃度范圍10 pg-2 μg，合成的miRNA拷貝數(shù)低可達60 copies，投入體積不超過3.25 μL。
二、逆轉錄程序
移液器輕輕混勻上述配制的反應液，按下表程序進行miRNA的逆轉錄反應：
反應溫度 | 反應時間 | 備注 |
37℃ | 50 min | miRNA加A尾及反轉錄過程 |
85℃ | 5 sec | 酶失活過程 |
【注】：逆轉錄產物可直接進行下游qPCR檢測。為避免逆轉錄體系對qPCR反應的抑制，可將產物稀釋10-1000倍后使用。若短時間內不進行下游實驗，可放置于-20℃保存。若長期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復凍融。
注意事項：
1）使用前，將凍存的各組分充分融解并輕輕混勻后使用。
2）實驗時，請使用無RNase污染的耗材，避免不必要的損失影響實驗結果。
3）本產品避免反復凍融，配制時應避免強光照射。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5）本產品僅作科研用途！
相關產品
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（加A法） | 11171ES03 | 1 mL |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（加A法） | 11171ES08 | 5 mL |
MolPure® Cell/Tissue miRNA Kit 細胞/組織miRNA提取試劑盒 | 19331ES50 | 50 T |
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MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit 細胞/組織總RNA提取試劑盒 | 19221ES50 | 50 T |
HB211216
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