促黃體生成激素放免試劑盒怎么操作

促黃體生成激素放免試劑盒基本信息簡介

中文名 促黃體生成激素；外文名  luteinizing hormone；屬于促性腺激素的一種 簡    稱 LH 亦稱促間質(zhì)細胞激素。促黃體生成激素是由腦垂體前葉嗜堿性細胞分泌的，它作用于成熟的卵胞，能引起排卵并生成黃體。還可促進黃體、內(nèi)莢膜和間質(zhì)細胞分泌動情素。在雄性動物，它作用于睪丸的間質(zhì)細胞促進其分泌雄性激素。由于雄性激素的作用，在第二性征發(fā)育過程中，精子完成發(fā)育。LH促進類固醇激素合成作用，據(jù)認為是以生成作為第二信息的cAMP為媒介的。LH為糖蛋白，分子量約3萬。在酸性溶液中，可解離成分子量約為15000的互不相同的兩個單基物（亞單位）。

羊的LH的兩條多肽鏈（單基物）的氨基酸排列已經(jīng)確定。其單基物之一與促卵泡激素（FSH）和促甲狀腺激素（TSH）的單基物之一方有著共同或相似的結(jié)構(gòu)。腦垂體分泌的LH，是受丘腦下部生成的黃體生成素釋放因子所促進的。

促黃體生成激素放免試劑盒操作方法簡介

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

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