Western blot細(xì)胞樣本的處理小貼士

Western blot細(xì)胞樣本的處理小貼士

上海信帆生物代做Western blot實(shí)驗(yàn)，下面我們給大家分享一下細(xì)胞樣本中關(guān)于懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞樣本的處理方法，希望對(duì)大家有所幫助，如果還有不清楚的地方，上海信帆生物科技有限公司，您身邊的科研專家！

細(xì)胞樣本做WB檢測(cè)
1、懸浮細(xì)胞樣品：把細(xì)胞及培養(yǎng)液一起收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反復(fù)3次，棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測(cè)。

2、貼壁細(xì)胞樣品：
2.1 胰酶消化：用胰酶將細(xì)胞消化后，收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反復(fù)3次，棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測(cè)。

2.2 細(xì)胞刮子收集細(xì)胞：對(duì)于某些蛋白（即對(duì)胰酶比較敏感或者實(shí)驗(yàn)特殊要求，如E-Cadherin不易用胰酶消化后進(jìn)行WB檢測(cè)），直接用細(xì)胞刮子刮下細(xì)胞，收集到EP、15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反復(fù)3次，棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測(cè)。

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