軟骨染色液（阿利新藍(lán)法,pH1.0）的操作方法

   阿利新藍(lán)(Alcian)又稱愛先藍(lán)或阿爾辛藍(lán)等，是一種類銅鈦花青共軛染料，zui初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合，也即阿爾辛藍(lán)與組織內(nèi)含有的陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。阿利新藍(lán)由中央含銅的酞菁環(huán)與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成，該異硫脲基呈中度堿性，使阿利新藍(lán)帶陽離子。pH值為2.5時，組織內(nèi)的羧基電離，帶有一個負(fù)電荷，與阿利新藍(lán)中的陽離子形成鹽鍵，使帶有羧基的酸性黏液物質(zhì)(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。pH值為1.0時，組織內(nèi)的硫酸根電離，帶有一個負(fù)電荷，與阿利新藍(lán)中的陽離子形成鹽鍵，使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質(zhì))染色。
  軟骨染色液(阿利新藍(lán)法,pH1.0)利用染液的不同pH 值可區(qū)分粘液物質(zhì)的類屬，pH為1時，羧基(COOH)不著色，硫酸基(OSO3H)著色，pH為 2.5 時，羧基染色良好而硫酸粘液著色不佳，使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白著色。
操作步驟(僅供參考)：
1、常規(guī)脫鈣，二甲苯脫蠟，通過梯度乙醇后，入蒸餾水再水化。
2、入Alcian酸化液浸泡3min。
3、入Alcian染色液染色30min。
4、流水沖洗5min。
5、梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片
注意事項(xiàng)：
1、固定液采用10%中性福爾馬林。
2、該法可區(qū)分鑒別硫酸黏蛋白和蛋白多糖，其pH=1.0。
3、已開封試劑應(yīng)在開封后6個月內(nèi)使用完，每次用后應(yīng)及時擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質(zhì)。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套
 本試劑僅適用于科研領(lǐng)域，不適用于研究診斷或其他用途。