信帆生物銷售脂肪酸合成酶（FAS），歡迎搶購!

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測定意義：

FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶，催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中，在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

測定原理：

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP⁺；NADPH在340nm有吸收峰，而NADP⁺沒有；通過測定340nm 光吸收下降速率，計算FAS活性。

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，－20℃保存。用前1d取出置于4℃充分解凍后混勻。

試劑二：粉劑×1瓶。臨用前加入440μL試劑四，充分溶解。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入440μL試劑四，充分溶解。

試劑四：液體×1瓶, 4℃保存。

試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入840μL試劑四，充分溶解。

粗酶液提取：

稱取約0.1g樣品，加試劑一1 mL充分研磨，16000rpm 4℃離心40min，取上清液，待測。

FAS測定操作：

1. 分光光度計預熱30min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑四置于40℃水浴中預熱30 min以上。

3. 空白管：在500μL EP管中依次加入20μL蒸餾水、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五，迅速混勻后于340nm處測定吸光值，記錄第30s和90s時吸光值，分別記錄為A1和A2。△A空=A1-A2。

4. 測定管：在500μL EP管中依次加入20μL上清液、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五，迅速混勻后于340nm處測定吸光值，記錄第30s和90s時吸光值，分別記錄為A1和A2。△A測=A3-A4。

注意事項：

上清液蛋白質(zhì)濃度需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。

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