上海信帆生物供應(yīng)真菌RNA提取試劑盒

上海信帆生物供應(yīng)真菌RNA提取試劑盒，產(chǎn)品有大量現(xiàn)貨，除此之外我們還備有血液RNA提取試劑盒，病毒RNA提取試劑盒等等，歡迎大家咨詢！

真菌RNA快速提取試劑盒適用于各種形態(tài)和各個種屬的真菌及革蘭氏陽性細菌，包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、 Schizosaccharomycespombe、Pichiapastoris、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus 等。

（一）菌體裂解：

1.將 50 mg 的干菌絲(或 100 mg的鮮菌絲、或適當數(shù)量的真菌菌落)轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 離心管中。對于液體真菌培養(yǎng)物，在1.5mL離心管中多次離心收集1-10 mL 的菌體沉淀。

2.在菌體沉淀中加入 0.4 mL 裂解液I震蕩混勻。

注：如果裂解液I存放時產(chǎn)生沉淀，請置于 65℃融化后使用。

3.加入 0.4 mL裂解液II，劇烈震蕩 30 s后65℃水浴 5 min。

4.12,000-15,000 rpm 離心3 min ，轉(zhuǎn)移上清到1.5 mL離心管中。

5.在上清中加入0.1 mL 的裂解液II和0.1mL氯方（自備）震蕩 30 s混勻。 

6.  12,000-15,000 rpm 離心3 min ，轉(zhuǎn)移上清到5 mL 離心管中。

（二）RNA收集：

1.  在步驟（一）所得的上清中加入3倍體積（約1.5 mL ）的結(jié)合液III和1倍體積（約0.5 mL）的結(jié)合液IV，顛倒數(shù)次混勻后，分多次上RNA吸附柱，每次上柱后均先室溫放置 2 min，然后 12,000 rpm 離心 1 min，倒掉穿透液。

2.  在吸附柱中加入500 μL洗滌液，12,000 rpm離心1 min，棄穿透液。

3.  再將吸附柱12,000 rpm離心30 s以甩干乙醇。

4.  將吸附柱放入一個干凈的1.5 mL離心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脫液，室溫靜置2 min。

5.  12,000 rpm離心2 min。離心管中溶液即為 RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

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