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中級(jí)會(huì)員 | 第13年

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如何用ELISA試劑盒檢測(cè)硫磷殘留

時(shí)間：2013/9/26閱讀：1121
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通過制備對(duì)硫磷的特異性抗體，建立了蔬菜中對(duì)硫磷殘留的酶聯(lián)免疫吸附分析法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）。先將對(duì)硫磷苯環(huán)上的硝基還原為氨基，然后采用重氮化法將氨基-對(duì)硫磷與牛血清白蛋白（BSA）或卵清白蛋白（OVA）相偶聯(lián)，分別合成了免疫原和包被抗原：氨基對(duì)硫磷-BSA、氨基對(duì)硫磷-OVA。對(duì)合成的抗原進(jìn)行紫外可見掃描，確證偶聯(lián)成功。用免疫原免疫新西蘭大耳白兔，制得對(duì)硫磷抗血清，測(cè)得其效價(jià)為1：2000，用飽和硫酸銨沉淀法得到純化抗體，與其它類似物的交叉反應(yīng)為甲基對(duì)硫磷：1.22％，毒死蜱：0.09％，殺螟松：0.06％，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為5-1000ng／mL。用此血清建立的ELISA方法檢測(cè)蔬菜樣品（小白菜、豆角、辣椒）中添加的對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品，平均回收率為96.52％，與GC方法的相關(guān)性很高，準(zhǔn)確性大大高于酶抑制法，整個(gè)測(cè)定大約在（不包括包被時(shí)間）1.5h內(nèi)完成。

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