上海信帆生物：雌二醇（E2）放免試劑盒操作說(shuō)明

碘[125I]雌二醇放射免疫分析藥盒使用說(shuō)明書

【藥品名稱】

通用名：碘[125I]雌二醇放射免疫分析藥盒

英文名：Iodine [125I] Estradiol Radioimmunoassay Kit

漢語(yǔ)拼音：Dian[125I] Ci’erchun Fangshemianyifenxi Yaohe

簡(jiǎn)稱：碘[125I]-E2放免藥盒

【成分】

1. 125I-E2：1瓶，紅色液體。放射性活度＜0.11MBq/瓶（100管）。

2. E2標(biāo)準(zhǔn)品：7瓶，淡黃色液體（去激素科研血清配制）。濃度分別為：0；10；50；100；250；500；1000 pg/ml。

3. 兔抗-E2 抗體：1瓶，藍(lán)色液體（兔抗）。

4. 質(zhì)量血清：2瓶，淡黃色液體。參考值范圍：質(zhì)控血清Ⅰ 56.5±12.8 pg/ml

                                       質(zhì)控血清Ⅱ 248.6±58.6pg/ml

5. 分離試劑：1瓶，懸浮液（含驢抗兔血清和PEG）。

【放射性核素半衰期】碘[125I]物理半衰期（T1/2）為59.7天。

【測(cè)定原理】

    本藥盒采用競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫分析方法，將放射性標(biāo)記抗原和非標(biāo)記待測(cè)抗原同時(shí)與*特異抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)，通過(guò)分離未結(jié)合的標(biāo)記抗原，測(cè)定標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù)，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線和RIA的數(shù)學(xué)模型計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。

【研究意義】

人體內(nèi)雌二醇是雌激素中生物活性zui強(qiáng)的雌激素。男性雌二醇由睪丸產(chǎn)生，女性則由卵巢分泌。循環(huán)血液中的雌二醇絕大部分與性激素結(jié)合球蛋白結(jié)合，在肝臟代謝，變成水溶性硫酸酯或葡萄糖醛酸酯，經(jīng)腎臟排出。男性E2水平升高主要是由睪丸或肝臟腫瘤所致。女性E2會(huì)促進(jìn)生殖上皮、乳腺、長(zhǎng)骨的生長(zhǎng)和第二性征的發(fā)育。測(cè)定E2對(duì)青春期前女性內(nèi)分泌疾病的診斷，對(duì)閉經(jīng)、月經(jīng)紊亂、卵巢功能評(píng)估有重要意義，是研究生殖生理和診斷不孕癥的重要手段。

【禁忌】受檢者在試驗(yàn)期間不得接受內(nèi)放射性核素檢查或治療。

【樣品采集】

取靜脈血分離血清，勿需加防腐劑及其它處理，溶血和脂血標(biāo)本影響測(cè)定結(jié)果。如不立即測(cè)量，可將血清樣品密封后，置于2-8℃或-20℃存儲(chǔ)。2-8℃保存不應(yīng)超過(guò)48小時(shí)；-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月，應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【操作程序】

取園底聚苯乙烯試管若干，編號(hào)后按以下加樣順序表進(jìn)行加樣。加樣前所有試劑包括待測(cè)樣品要搖勻。為了加樣準(zhǔn)確各種試劑和樣品平衡到室溫之后加樣。

加樣程序表                                                               單位：μl

【數(shù)據(jù)處理】

1. 設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B，非特異管計(jì)數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計(jì)算公式為：

B/B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%

    以上各標(biāo)準(zhǔn)品B/B0%為縱軸，以相應(yīng)濃度為橫軸，在logit-log或半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制劑量反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線，待測(cè)樣品濃度可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。

2. 計(jì)算機(jī)處理：采用RIA數(shù)據(jù)處理軟件，選擇合適的數(shù)學(xué)模型計(jì)算結(jié)果。

【技術(shù)指標(biāo)】

1. 非特異結(jié)合率（NSB）：＜5%
2. 零管結(jié)合率：> 30%
3. 靈敏度：＜5 pg/ml。
4. 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)＜10%，批間變異系數(shù)＜15%。
5. 準(zhǔn)確度：回收率94-109%.
6. 標(biāo)準(zhǔn)曲線：相關(guān)系數(shù)>0.990。
7. 單位換算：（pmol/ml）=（pg/ml）×3.67

【注意事項(xiàng)】

1. 所有試劑包括待測(cè)樣品事先應(yīng)在室溫平衡。使用時(shí)須充分搖勻。
2. 分離試劑在2~8℃保存，不可冰凍。
3. 離心速度可用3000轉(zhuǎn)/分，但至少30分鐘。離心時(shí)機(jī)內(nèi)溫度在4~25℃之間。
4. 不同批號(hào)試劑不能混合使用，建議樣品做雙管檢驗(yàn)。
5. 本實(shí)驗(yàn)使用放射性同位素，操作應(yīng)由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的專業(yè)技術(shù)人員按放免檢驗(yàn)的規(guī)定進(jìn)行。產(chǎn)生的放射性廢物應(yīng)按國(guó)家有關(guān)規(guī)定處理。

【孕婦、哺乳期婦女、兒童用藥】無(wú)特殊要求

【正常參考值】

   男：青春期前：＜10 pg/ml           女：青春期前：＜8 pg/ml

       成   人 ：＜70 pg/ml               卵泡期：10-90 pg/ml

                                         排卵期：100-500 pg/ml

                                         黃體期：50-240 pg/ml

                                         絕經(jīng)期：＜60 pg/ml

   各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件和接觸的人群建立自己的正常值范圍。以上數(shù)據(jù)僅供參考。

【貯藏】2~8℃遮光保存，常溫運(yùn)輸5天內(nèi)不影響藥盒質(zhì)量。

【有效期】一個(gè)月

【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局-國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)-WS1-(R-34)-2004Z

【批準(zhǔn)文號(hào)】國(guó)藥準(zhǔn)字S19973002

上海信帆生物代做放免實(shí)驗(yàn)，銷售各類放免試劑盒，包括美國(guó)鳳凰，索靈，法國(guó)CIS等品牌，咨詢。