上海信帆：臺盼藍(lán)染色液（0.4%）說明書

臺盼藍(lán)染色液(0.4%)

產(chǎn)品簡介： 

臺盼藍(lán)(Trypan blue)又稱錐藍(lán)或錐蟲藍(lán)等，分子式為C34H24N6Na4O14S4，分子量為960.81，CAS Number 72-57-1，是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，即產(chǎn)生所謂的據(jù)染現(xiàn)象，而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色，是zui常用的檢測細(xì)胞活率的方法。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍(lán)染色可以非常簡便、快速的區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。

臺盼藍(lán)染色液(0.4%)常用于檢測細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活。活細(xì)胞不會被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會被染成淡藍(lán)色。臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較的定量，0.4%為zui常用的濃度。  

產(chǎn)品組成：   

 操作步驟(僅供參考)： 

 1、收集細(xì)胞：  

    如果收集貼壁細(xì)胞，應(yīng)用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細(xì)胞，收集細(xì)胞。如果收集懸浮細(xì)胞，則可以直接收集細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在1000～2000g離心1min，棄上清，用1ml PBS重新懸浮細(xì)胞沉淀。

 2、臺盼藍(lán)染色：  

    吸取100μl細(xì)胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內(nèi)， 加入100μl Trypan blue stain(0.4%)輕輕混勻，靜置染色3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長，但不宜超過10min)。 

3、細(xì)胞計(jì)數(shù)： 

   吸取經(jīng)過染色后的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少需要數(shù)500個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下：    

細(xì)胞存活率＝(細(xì)胞總數(shù)－藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%

注意事項(xiàng)： 

1、對人體有輕微毒性，請注意小心防護(hù)。 

2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。  

3、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。  

有效期： 6個(gè)月有效。