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凝膠遷移貨電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。目前這一技術(shù)還可以用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。其基本流程是將純化的蛋白和同位素生物素?zé)晒馑貥?biāo)記的DNA或RNA探針進(jìn)行孵育,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。
DNA復(fù)合物或RNA復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動(dòng)的慢。競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA或RNA的片段和寡核苷酸片段(特異),和其他非相關(guān)片段(非特異),來(lái)確定DNA或RNA結(jié)合蛋白的特異性。還可以通過(guò)在體系中加入目的蛋白的特異性抗體,發(fā)生超遷移(super-shift),確定目的蛋白與基因片段的結(jié)合。在競(jìng)爭(zhēng)的特異性和非特異性前段的存在下,依據(jù)復(fù)合物的特點(diǎn)和強(qiáng)度來(lái)確定特異結(jié)合。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
EMSA實(shí)驗(yàn)
EMSA探針費(fèi)用
樣本保存及運(yùn)輸:歡迎
EMSA ( Electrophoretic Mobility Shift Assay ) 凝膠遷移實(shí)驗(yàn)是一種研究DNA與蛋白質(zhì)或RNA與蛋白質(zhì)相互作用的常用技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)是基于DNA/蛋白質(zhì)或RNA/蛋白質(zhì)復(fù)合體在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中有不同遷移率的原理。當(dāng)核轉(zhuǎn)錄因子與一條人工合成的特異的DNA或RNA結(jié)合后,其在PAGE中的遷移率將小于未結(jié)合核蛋白轉(zhuǎn)錄因子的DNA,從而檢測(cè)到活化的與DNA或RNA結(jié)合的蛋白轉(zhuǎn)錄或調(diào)節(jié)因子。
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