補(bǔ)體成分3重組蛋白定制服務(wù)前需要考慮的問題

補(bǔ)體成分3基本信息

中文名稱補(bǔ)體成分3

英文名稱C3

定　　義 參與3條補(bǔ)體活化途徑的固有成分，為血漿含量zui高的補(bǔ)體成分。補(bǔ)體活化時，C3可被C3轉(zhuǎn)化酶裂解為小片段C3a和大片段C3b：C3a游離于液相，具有過敏毒素活性；C3b是3條激活途徑C5轉(zhuǎn)化酶和旁路途徑C3轉(zhuǎn)化酶的關(guān)鍵組分，并可與免疫復(fù)合物、微生物、高分子物質(zhì)或細(xì)胞膜結(jié)合，從而介導(dǎo)調(diào)理作用和免疫黏附作用。

應(yīng)用學(xué)科 免疫學(xué)（一級學(xué)科），免疫系統(tǒng)（二級學(xué)科），免疫分子（三級學(xué)科）

補(bǔ)體成分3(C3)重組蛋白用法

PBS或其它。

補(bǔ)體成分3儲存條件

避免反復(fù)凍融。2-8°C不超過一個月，-80°C不超過12個月。

穩(wěn)定性

熱穩(wěn)定性以損失率顯示。

客戶在補(bǔ)體成分3(C3)重組蛋白定制服務(wù)前需要考慮的問題：

1，蛋白本身的特性：蛋白的可能功能，蛋白在細(xì)胞內(nèi)外的定位，蛋白的分子量大小，蛋白可能的結(jié)構(gòu)復(fù)雜度，蛋白的翻譯后修飾程度，蛋白是否是毒性蛋白分子。

2，下游實(shí)驗(yàn)對蛋白活性的要求：不同的研究目的對重組蛋白活性的需要不相同，部分實(shí)驗(yàn)需要蛋白功能結(jié)構(gòu)盡可能接近天然蛋白。

3，下游實(shí)驗(yàn)對蛋白純度的要求：蛋白的純度受蛋白表達(dá)量的影響，更高的純度會需要更多的純化流程，更長的純化時間，有可能不利于較好地保留蛋白活性，所以蛋白的純度和蛋白的活性需要綜合平衡考慮；提高蛋白功能assay的特異性可以有效地減少非特異性雜蛋白的干擾。

4，下游實(shí)驗(yàn)對蛋白數(shù)量的需要：常規(guī)的蛋白功能學(xué)研究約需要10-100μg重組蛋白，特異性抗體制備約需要2-5mg重組蛋白，藥物assay和動物實(shí)驗(yàn)可能需要更多數(shù)量蛋白。

5，選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)：不同的蛋白表達(dá)系統(tǒng)有不同的優(yōu)勢，需要根據(jù)對問題1-4的充分考慮，選擇的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)。

6，親和純化tag的保留：常規(guī)小的親和tag對補(bǔ)體成分3(C3)重組蛋白功能影響不太，可以保留，也減少去除tag過程對蛋白活性和蛋白得率的不利影響。

7，蛋白保存buffer是否有特別要求：根據(jù)蛋白特性和下游實(shí)驗(yàn)去除不適合放在蛋白保存

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