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PCR技術(shù)服務(wù),QPCR技術(shù)服務(wù),RT-PCR技術(shù)服務(wù)

時(shí)間:2017-8-17閱讀:1817
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PCR技術(shù)服務(wù),QPCR技術(shù)服務(wù),RT-PCR技術(shù)服務(wù)

上海信帆生物提供PCR技術(shù)服務(wù),QPCR技術(shù)服務(wù),RT-PCR技術(shù)服務(wù),代測(cè)時(shí)間為2周,提供原始數(shù)據(jù),電泳圖,動(dòng)力擴(kuò)增曲線圖,實(shí)驗(yàn)室儀器型號(hào),實(shí)驗(yàn)操作步驟等,咨詢!

QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng),也叫實(shí)時(shí)定量基因擴(kuò)增熒光檢測(cè)系統(tǒng),簡(jiǎn)稱QPCR。

 

PCR技術(shù)服務(wù),QPCR技術(shù)服務(wù),RT-PCR技術(shù)服務(wù)

 

QPCR有以下特點(diǎn):

檢測(cè)時(shí)間短,只須45分鐘~1小時(shí)10分鐘(試劑各異),而定性PCR須3~4小時(shí),酶免終點(diǎn)定量須6~8小時(shí),熒光終點(diǎn)定量須2~3小時(shí)。

操作極其簡(jiǎn)單:前處理后,樣本插入儀器一小時(shí)后到電腦上來出報(bào)告即可,無須開蓋,移樣本(以前方法),避免污染。

結(jié)果:定性PCR只能定性,很粗略,終點(diǎn)定量PCR由于只能在40個(gè)熱循環(huán)結(jié)束后檢測(cè)熒光,被測(cè)熒光達(dá)到飽和導(dǎo)致定量不夠,屬于半定量狀態(tài)。而實(shí)時(shí)熒光QPCR是在擴(kuò)增的每時(shí)每刻連續(xù)檢測(cè)各樣本的熒光值的變化,

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,PCR的zui大特點(diǎn),是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所的毛發(fā)、皮膚或血液,只要能分離出一丁點(diǎn)的DNA,就能用PCR加以放大,進(jìn)行比對(duì)。這也是“微量證據(jù)”的威力之所在。由1983年美國(guó)Mullis首先提出設(shè)想,1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng),即簡(jiǎn)易DNA擴(kuò)增法,意味著PCR技術(shù)的真正誕生。到如今2013年,PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。1973 年,中國(guó)臺(tái)灣科學(xué)家錢嘉韻,發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻(xiàn)。
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶zui適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備,能在變性溫度,復(fù)性溫度,延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。

 

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