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LFB染色實驗代測

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更新時間:2024-10-26 15:57:46瀏覽次數:901次

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LFB染色實驗代測
實驗樣本類型:石蠟切片
主要用途:觀察神經髓鞘的形態(tài)及變化
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LFB染色實驗代測

LFB染色介紹:

勞克堅牢藍(Luxol fast blue,簡稱LFB),是對皮膚組織神經中髓鞘,腦,脊髓,(藍色,背景紅色)進行染色。

LFB染色實驗步驟(僅供參考):

1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2、染色:切片置于0.1% LFB染液60℃孵育過夜,自來水沖洗;

3、分化:切片放入70%乙醇中(無固定時間);切片浸入0.05% *中,鏡下控制分色時間至分色*(可見灰質部分顏色變淡);如分化不好這兩步交替進行幾次至鏡檢滿意,水洗;

4、伊紅復染:0.1%伊紅復染1min,水洗;

5、封片:電吹風吹干或烘箱吹干;二甲苯透明數分鐘,中性樹膠封片。

6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

染色結果:神經髓鞘呈藍色;其他成分呈紅色。

 

注意事項:

1、染色前,固藍溶液需要預熱,染液溫度會對標本著色強弱有一定影響。
2、70%的酒精和0.05%*分化可以反復進行,直至灰質變?yōu)闊o色或者淡藍色。
3、固藍染完冷卻從固藍拿出后,需要盡快分化,玻片不能長時間放在水中也不能長時間放在外面使組織干掉。在水中浸泡時間過長,固藍的顏色會掉,會導致染色特異性不明顯;組織干了,會導致再分化時,分化不均勻。

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