導(dǎo)讀
城市地下污水系統(tǒng)暗藏人們的生活痕跡，毒品在城市污水中也難以隱匿。毒品吸食后經(jīng)人體代謝排入生活污水，運(yùn)用科研儀器對(duì)污水進(jìn)行DU情檢測(cè)、追根溯源，可進(jìn)一步提升追DU查毒效率和準(zhǔn)確度。
檢測(cè)方法
“污水驗(yàn)DU”技術(shù)原理來(lái)源于“污水流行病學(xué)”，是采用“固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)”對(duì)特定區(qū)域生活污水中的毒品及其代謝物含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)合污水水質(zhì)參數(shù)和污水處理廠服務(wù)人口數(shù)量，推算出該區(qū)域吸DU人群規(guī)模、毒品消耗量等，進(jìn)而評(píng)估該區(qū)域DU情形勢(shì)。由于城市每天產(chǎn)生大量的污水，而污水基質(zhì)復(fù)雜，毒品的含量極低（ng/L級(jí)別），因此需要對(duì)污水樣品進(jìn)行獨(dú)立的凈化富集后才能上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，增加了檢測(cè)人員的工作強(qiáng)度和工作量。
本文基于以上考慮，建立了采用全自動(dòng)固相萃取、LC-MS/MS定性定量同時(shí)測(cè)定污水水樣中5種常見(jiàn)毒品的方法。本方法采用MCX陽(yáng)離子交換固相萃取柱富集水樣，5%氨化甲醇洗脫，LC-MS/MS進(jìn)行上機(jī)分析，內(nèi)標(biāo)法定量。在0.1 μg/L的加標(biāo)水平下，5種化合物的平均回收率在73.4%~93.9%之間，RSD值小于10.0%，符合分析與鑒定要求。說(shuō)明該方法可作為污水驗(yàn)DU的有效解決方案。
?？茟?yīng)用方案
1.儀器與耗材
儀器和設(shè)備
Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀；
Auto EVA 60全自動(dòng)平行濃縮儀；
高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀 Agilent 1290+6470；
RayCureTM MCX陽(yáng)離子交換柱（60mg/3ml）（貨號(hào)：RC-204-72855）
試劑和標(biāo)準(zhǔn)品
乙腈、甲酸、甲醇均為TEDIA公司色譜純?cè)噭?，乙酸銨、濃鹽酸、氨水均為西隴科學(xué)分析純?cè)噭蒑illi-Q超純水系統(tǒng)制得。
5種DU品標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源于某市公& 安客戶(hù)
固相萃取凈化條件
| 全自動(dòng)固相萃取儀 | Fotector Plus 高通量全自動(dòng)固相萃取儀 |
| 固相萃取柱 | MCX陽(yáng)離子交換柱(RayCureTM, 60 mg/3 mL, 貨號(hào)：RC-204-72855) |
| 活化 | 甲醇、水 |
| 淋洗 | 水、甲醇 |
| 洗脫 | 5%氨化甲醇 |
樣品制備與富集
將污水水樣經(jīng)過(guò)抽濾裝置進(jìn)行過(guò)濾，準(zhǔn)確量取50 mL于上樣管中，加入鹽酸調(diào)節(jié)pH=2左右。依次用5 mL甲醇和5 mL水分別以2 ml/min的速率活化MCX陽(yáng)離子交換固相萃取柱。將樣品以2 ml/min的速度經(jīng)固相萃取小柱富集后，用2 ml水清洗樣品瓶并過(guò)柱，再用4 mL甲醇淋洗固相萃取柱。將柱子擠干，然后用4 ml 5%氨化甲醇以1 ml/min的速度洗脫并收集洗脫液，固相萃取程序如圖-1所示。
將洗脫液用Auto EVA 60在40度、3 psi的條件下氮吹至近干，用200 uL水復(fù)溶，加入內(nèi)標(biāo)后過(guò)濾膜上LC-MS/M進(jìn)行分析。
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| 圖-1 Fotector Plus 高通量全自動(dòng)固相萃取儀 | 圖-2 Fotector Plus污水驗(yàn)毒固相萃取方法 |
液質(zhì)聯(lián)用儀器條件
| 色譜柱 | ACQUITY UPLC BEH C18 (100mm ×2.1 mm×1.7 μm ) |
| 流速 | 0.30 mL/min |
| 流動(dòng)相 | A:5 mmol/L乙酸銨溶液(含0.1% 甲酸)，B:乙腈 |
| 柱溫 | 35°C |
| 進(jìn)樣量 | 2 μL |
| 檢測(cè)器 | Agilent 6470 |
| 離子模式 | ESI+ |
| 吹掃氣 | 8 L/min |
| 氮?dú)鉁囟?/span> | 330 °C |
| 簇電壓 | 3500 |
| 霧化壓力 | 45 psi |
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梯度洗脫 | 0.0-1.0 min，5-5%流動(dòng)相B；1.0-2.0 min，5-15%流動(dòng)相B；2.0-8.0 min，15-30%流動(dòng)相B；8.0-8.5 min，30-95%流動(dòng)相B；8.5-11.0 min，95-95%流動(dòng)相B；11.0-12.0 min，95-5%流動(dòng)相B；12.0-14.0 min，5-5%流動(dòng)相B. |
液質(zhì)MRM參數(shù)
| 序號(hào) |
| 保留時(shí)間 | 母離子 | 子離子 | 碎裂電壓 | 碰撞能量 |
| 1 | 甲基苯 bing胺 | 4.2 | 150.1 | 119.1 | 80 | 8 |
| 91.1 | 80 | 20 | ||||
| 2 | ma 啡 | 4.7 | 286.2 | 165 | 150 | 40 |
| 152 | 150 | 65 | ||||
| 3 | 可dai因 | 5.6 | 300.2 | 199.2 | 110 | 16 |
| 165.3 | 110 | 24 | ||||
| 4 | 可ka因 | 9.8 | 304.2 | 182 | 120 | 16 |
| 82.1 | 120 | 32 | ||||
| 5 | 氯an酮 | 8.4 | 238.1 | 220 | 80 | 12 |
| 125 | 80 | 32 |
表1 .LC/MS/MS保留時(shí)間以及質(zhì)譜參數(shù)
4.方法可行性驗(yàn)證
本文建立的方法其準(zhǔn)確性與精密度采用加標(biāo)回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)進(jìn)行衡量。在空白水樣中添加濃度為0.1 μg/L的5種DU品標(biāo)準(zhǔn)品，按照上述3.2步驟進(jìn)行前處理操作。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：5種化合物的平均回收率在73.4%~93.9%之間，RSD小于10.0%，符合分析與鑒定要求。具體數(shù)據(jù)如表-2所示。表2. 0.1μg/L加標(biāo)回收率及RSD(%)(n=3)
| 化合物 | 平均回收率/% | RSD/% |
| 甲基苯 bing胺 | 80.0 | 3.2 |
| ma啡 | 93.9 | 2.6 |
| 可dai因 | 78.6 | 5.3 |
| 可ka因 | 73.4 | 8.6 |
| 氯an酮 | 76.5 | 4.7 |
5.結(jié)果與討論
由于大部分DU品都屬于弱堿性化合物，所以使用陽(yáng)離子交換固相萃取柱進(jìn)行凈化富集效果更好。在過(guò)柱前首先需要將水樣調(diào)成酸性以利于化合物更好地在柱子上保留，后使用堿性的氨化甲醇溶液進(jìn)行洗脫。
6.總結(jié)
采用Fotector Plus高通量全自動(dòng)固相萃取儀對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)能同時(shí)進(jìn)行6個(gè)樣品凈化，連續(xù)自動(dòng)處理60個(gè)樣品，做樣通量高；同時(shí)可無(wú)人值守，大幅度減少了工作人員的工作量，提高了工作效率。此外還可避免工作人員因操作失誤導(dǎo)致的檢測(cè)偏差，也可減少實(shí)驗(yàn)人員更迭對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。
Auto EVA 60全自動(dòng)平行濃縮儀處理通量高，60個(gè)樣品可同時(shí)進(jìn)行氮吹，實(shí)驗(yàn)平行性好；而且采用氮吹針自動(dòng)追隨液面的設(shè)計(jì)，無(wú)需手動(dòng)調(diào)節(jié)氮吹針且耗氣量小，省時(shí)省力。
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| 高通量全自動(dòng)固相萃取儀 | 全自動(dòng)平行濃縮儀 |
| 凈化 | 濃縮 |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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