自2011年5月1日醉駕入刑以來，人們越來越重視酒后駕駛行為。此外，酒類飲料的主要成分是乙醇，大量飲用高濃度酒可能會造成酒精中毒甚至是死亡,過量飲酒同時也會使行為異常，從而發(fā)生意外甚至犯罪，比如酒后鬧事、醉酒死亡等。因此，在發(fā)生某些自殺、兇殺的案件時，執(zhí)法部門也要首先確定是否有酒精作用因素，所以從這方面來看，測定血液中乙醇的含量也有著至關(guān)重大的意義。
儀器和耗材
1儀器
AP 500全自動樣品處理工作站
氣相色譜儀（帶火焰離子化檢測器）
頂空自動進(jìn)樣器
2 試劑
乙醇、叔丁醇均為色譜純試劑
血液中乙醇標(biāo)準(zhǔn)樣品
樣品提取與前處理
1 樣品前處理
本次方法驗證參考GA/T842—2019《血液酒精含量的檢驗方法》的要求。分別移取100μL血液中乙醇樣品，加入20mL頂空瓶中，然后加入500μL叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液，作頂空進(jìn)樣分析。將頂空瓶及裝有血液中乙醇標(biāo)準(zhǔn)樣品的采血管放入AP 500樣品架中，使用AP 500全自動樣品處理工作站，由工作站全自動完成采血管的抓取與轉(zhuǎn)移，采血管信息的掃碼錄入，血樣混勻，采血管開蓋與關(guān)蓋，血液樣品的抽取與精準(zhǔn)分推，頂空瓶的抓取與轉(zhuǎn)移，頂空瓶的開蓋與鉗蓋密封，頂空瓶內(nèi)樣品添加與稀釋操作。
2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
分別移取100μL系列濃度乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(5、10、20、50、80、200、300 mg/100 mL)，加入20 mL頂空瓶中，然后均加入500 μL叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液，每個濃度點的標(biāo)準(zhǔn)溶液獨立重復(fù)測定2次。
3 樣品分析
將AP500全自動樣品處理工作站處理完成的樣品，進(jìn)行頂空進(jìn)樣分析。
檢測條件
氣相色譜條件
色譜條件：柱溫：50℃；檢測器：火焰離子化檢測器；檢測器溫度：200℃；進(jìn)樣口溫度：250℃。頂空自動進(jìn)樣器，頂空爐溫：65℃；取樣針溫度：90℃；傳輸線溫度：110℃；樣品瓶加熱平衡時間10 min。
回收率與精密度
取同一空白血樣，分別添加乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，使血液中乙醇的質(zhì)量濃度分別為120mg / 100mL，平行6份，乙醇平均加標(biāo)回收率為101%，RSD為1.35。
結(jié)果與討論
本次方法驗證滿足GA/T 842—2019《血液酒精含量的檢驗方法》的要求。AP 500全自動樣品處理工作站的設(shè)計從如何提高樣品前處理效率的角度考慮，將樣品處理全過程自動化，智能的計算系統(tǒng)幫助實現(xiàn)各種濃度液體的制備，同時設(shè)備上集成混勻，掃碼等模塊，可對頂空瓶進(jìn)行轉(zhuǎn)移和鉗蓋密封操作，有效地解決了實驗員在血液樣品配制過程中耗時長、操作繁瑣等問題，更重要的是全過程無需實驗員值守，盡可能地減少實驗員與血液、高毒性化學(xué)品的接觸，保障實驗員的健康，打造高效安全的實驗室。
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