檢測原理

特點

缺點

紫外-可見光（UV-VIS）檢測器

基于Lambert-Beer定律，即被測組分對紫外光或可見光具有吸收，且吸收強(qiáng)度與組分濃度成正比。

很多有機(jī)分子都具紫外或可見光吸收基團(tuán)，有較強(qiáng)的紫外或可見光吸收能力，因此UV-VIS檢測器既有較高的靈敏度，也有很廣泛的應(yīng)用范圍。由于UV-VIS對環(huán)境溫度、流速、流動相組成等的變化不是很敏感，所以還能用于梯度淋洗。

• 對沒有紫外/可見波長吸收的樣品無法檢測
• 流動相的選擇受到流動相組分對紫外可見光的吸收影響，現(xiàn)有紫外可見檢測器在常用的流動相下當(dāng)波長低于210nm時檢測效果較差；
• 不同物質(zhì)在同一檢測波長下的響應(yīng)因子不相同

二極管陣列檢測器（diode-array detector, DAD）

以光電二極管陣列（或CCD陣列，硅靶攝像管等）作為檢測元件的UV-VIS檢測器。它可構(gòu)成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光，再入射到陣列式接受器上的全部波長的信號，然后，對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到的是時間、光強(qiáng)度和波長的三維譜圖。與普通UV-VIS檢測器不同的是，普通UV-VIS檢測器是先用單色器分光，只讓特定波長的光進(jìn)入流動池。而二極管陣列UV-VIS檢測器是先讓所有波長的光都通過流動池，然后通過一系列分光技術(shù)，使所有波長的光在接受器上被檢

特點與紫外檢測器相同，同時可動態(tài)的在同一時間檢測所有波長下的吸收。

• 與紫外可見家測起相
• .靈敏度和重現(xiàn)性低于紫外檢測器。

示差折光檢測器（differential refractometers, RI）

原理：基于樣品組分的折射率與流動相溶劑折射率有差異，當(dāng)組分洗脫出來時，會引起流動相折射率的變化，這種變化與樣品組分的濃度成正比。

RI 檢測器根據(jù)其設(shè)計原理可分為反射型（根據(jù)Fresnel定律）、折射型（根據(jù)Snell定律）和干涉型三種類型。

示差折光檢測法也稱折射指數(shù)檢測法。絕大多數(shù)物質(zhì)的折射率與流動相都有差異，所以RI是一種通用的檢測方法。雖然其靈敏度比其他檢測方法相比要低1-3個數(shù)量級。對于那些無紫外吸收的有機(jī)物（如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴）是比較適合的。在凝膠色譜中是*檢測器，在制備色譜中也經(jīng)常使用。

• 靈敏度很低
• 不能用于梯度洗脫系統(tǒng)

蒸發(fā)光散射檢測器（evaporative light-scattering detector, ELSD）

ELSD是基于溶質(zhì)的光散射性質(zhì)的檢測器。由霧化器、加熱漂移管（溶劑蒸發(fā)室）、激光光源和光檢測器（光電轉(zhuǎn)換器）等部件構(gòu)成。色譜柱流出液導(dǎo)入霧化器，被載氣（壓縮空氣或氮氣）霧化成微細(xì)液滴，液滴通過加熱漂移管時，流動相中的溶劑被蒸發(fā)掉，只留下溶質(zhì)，激光束照在溶質(zhì)顆粒上產(chǎn)生光散射，光收集器收集散射光并通過光電倍增管轉(zhuǎn)變成電信號。

因為散射光強(qiáng)只與溶質(zhì)顆粒大小和數(shù)量有關(guān)，而與溶質(zhì)本身的物理和化學(xué)性質(zhì)無關(guān)，所以ELSD屬通用型和質(zhì)量型檢測器。適合于無紫外吸收、無電活性和不發(fā)熒光的樣品的檢測。其靈敏度與載氣流速、汽化室溫度和激光光源強(qiáng)度等參數(shù)有關(guān)。與示差折光檢測器相比，它的基線漂移不受溫度影響，信噪比高，也可用于梯度洗脫。檢測任何不揮發(fā)樣品，提供的樣品組份和幾乎相同的響應(yīng)因子，靈敏度高于RI、低波長紫外檢測器和其他ELSD，不需要日常維護(hù)，可和HPLC、GPC和SFC連用

1．流動相相不能含有不揮發(fā)組分（可使用有機(jī)酸堿替代）

熒光檢測器（fluorescence detector）

原理： 許多有機(jī)化合物，特別是芳香族化合物、生化物質(zhì)，如有機(jī)胺、維生素、激素、酶等，被一定強(qiáng)度和波長的紫外光照射后，發(fā)射出較激發(fā)光波長要長的熒光。熒光強(qiáng)度與激發(fā)光強(qiáng)度、量子效率和樣品濃度成正比。有的有機(jī)化合物雖然本身不產(chǎn)生熒光，但可以與發(fā)熒光物質(zhì)反應(yīng)衍生化后檢測。
結(jié)構(gòu)

特點： 有非常高的靈敏度和良好的選擇性，靈敏度要比紫外檢測法高2-3個數(shù)量級。而且所需樣品量很小，特別適合于藥物和生物化學(xué)樣品的分析。

• 樣品的選擇性較強(qiáng)
• 其它與紫外檢測器相似

檢測器

檢測下限/(g/ml) 

線性范圍

選擇性

梯度淋洗 

主要特點 

紫外-可見光

有

可

對流速和溫度變化敏感；池體積可制作得很??；對溶質(zhì)的響應(yīng)變化大。

熒光

有

可

選擇性和靈敏度高；易受背景熒光、消光、溫度、pH和溶劑的影響。

電導(dǎo)

有

不可

是離子性物質(zhì)的通用檢測器；受溫度和流速影響；不能用于有機(jī)溶劑體系。

電化學(xué)

有

困難

選擇性高；易受流動相pH值和雜質(zhì)的影響；穩(wěn)定性較差。

蒸發(fā)光散射

無

可

可檢測所有物質(zhì)。

示差折光

無

不可

可檢測所有物質(zhì)；不適合微量分析；對溫度變化敏感