分光光度計的原理及分類
分光光度計的定義
分光光度計是利用物質(zhì)對光的選擇吸收或發(fā)射的現(xiàn)象,通過測量不同波長的光能量變化而對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器。
•按波段范圍分類
可分為真空紫外光譜儀,紫外-可見-近紅外分光光度計,紅外分光光度計,遠(yuǎn)紅外光譜儀等
真空紫外10-200nm 紫外200-400nm
可見400-800nm 近紅外800-2500nm
中紅外2.5um-50um 遠(yuǎn)紅外50-1000um
•按光譜測量類型分類
用于測量吸收光譜的紫外可見分光光度計;紅外分光光度計;原子吸收分光光度計
用于測量熒光光譜的熒光分光光度計;原子熒光分光光度計等
用于測量拉曼散射光譜的拉曼分光光度計;激光拉曼光譜儀等
•按光度測量方式分類
可分為單光束式分光光度計和雙光束式分光光度計等
單光束式是只用一束光線工作,結(jié)構(gòu)簡單,維修方便,適用于定波長處的測量和分析
雙光束式是把入射光分為兩束,一束光線通過樣品池,另一束通過參比池,然后進(jìn)行對比測量。
通過這種結(jié)構(gòu)可以快速得到測量數(shù)據(jù)以及可以消除和補償因光源、探測器等不穩(wěn)定因素所引起的誤差,適用于連續(xù)監(jiān)控方面的檢測。
•紫外可見分光光度計原理
紫外可見分光光度計的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱朗伯-比爾定律,是由1768年朗伯提出的光的吸收與介質(zhì)厚度之間的關(guān)系和1852年比爾提出的光的吸收與吸收介質(zhì)濃度之間的關(guān)系合并而成的。
它的數(shù)學(xué)式是A=KCL 其中A:吸光度 K:吸光系數(shù) C:濃度 L:介質(zhì)厚度
當(dāng)入射光強度一定時,介質(zhì)的吸光度與介質(zhì)中吸光物質(zhì)和介質(zhì)濃度的乘積成正比——定量功能的依據(jù)由于吸光物質(zhì)對光的選擇性吸收是其自身的物理性質(zhì),經(jīng)過長期的實驗摸索,我們知道了大多數(shù)物質(zhì)吸收峰的波長點,那再根據(jù)在某一波長點有吸收峰,可以反推導(dǎo)出吸光物質(zhì)的性質(zhì)——定性功能的依據(jù)(半定性)
•紫外可見分光光度計結(jié)構(gòu)
紫外可見分光光度計的結(jié)構(gòu)主要是由光源、單色器、樣品室、光電轉(zhuǎn)換、前置放大、電源控制、數(shù)據(jù)處理、以及外設(shè)等部分組成。