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技術(shù)文章

熒光定量PCR技術(shù)簡介

閱讀:3552          發(fā)布時(shí)間:2013-11-14

定量PCR簡介

    熒光定量PCR技術(shù)是普通PCR技術(shù)的改良和發(fā)展,它提高了普通PCR技術(shù)的特異性和準(zhǔn)確性,能做到實(shí)時(shí)監(jiān)控和準(zhǔn)確定量,廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、臨床檢驗(yàn)、海關(guān)檢疫等各個(gè)領(lǐng)域。

 

定量PCR服務(wù)內(nèi)容

1、 合成

設(shè)計(jì)合成各種標(biāo)記探針并可根據(jù)客戶要求負(fù)責(zé)探針的調(diào)試(詳見合成)

2、 檢測

mRNA表達(dá)檢測及mRNA表達(dá)譜芯片后期驗(yàn)證

MicroRNA檢測及MicroRNA表達(dá)譜芯片后期驗(yàn)證

SNP檢測

基因copy數(shù)檢測

病原微生物樣品檢測

3、 研發(fā)

接受采用熒光定量PCR的檢測方法針對各種檢測目標(biāo)的合作研發(fā)和委托研發(fā)。

 

定量PCR實(shí)驗(yàn)流程

PCR引物探針設(shè)計(jì)合成調(diào)試

標(biāo)準(zhǔn)品制作

樣本核酸抽提反轉(zhuǎn)錄

擴(kuò)增檢測

數(shù)據(jù)匯總初步分析

 

定量PCR檢測周期

常規(guī)檢測任務(wù)2-3周內(nèi)完成,具體情況根據(jù)要檢測的基因和樣本數(shù)而定。

 

定量PCR客戶提供

詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求,基因名稱等(詳見服務(wù)申請單),提供待測樣本,保證樣本質(zhì)量。

 

定量PCR送樣要求

細(xì)胞(≥10 5 個(gè))                                                 

組織(≥100mg,黃豆大?。?/span>

全血(≥0.5ml)                                                     

基因組DNA(≥5ug)

 

報(bào)定量PCR告內(nèi)容

提供電泳圖片、熒光擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線、原始報(bào)告等。

 

定量PCR應(yīng)用領(lǐng)域

1、基礎(chǔ)研究

a 基因表達(dá)分析

研究目標(biāo)基因(mRNA和micrRNA)的表達(dá)狀況,準(zhǔn)確地進(jìn)行定量分析。

B 基因型分析

針對相應(yīng)的的等位基因或SNP位點(diǎn),設(shè)計(jì)特異性的探針進(jìn)行擴(kuò)增檢測。

2、臨床病原微生物檢測(科研分析)

對臨床科研樣品中的細(xì)菌、病毒等病源微生物做定性定量分析。

對進(jìn)出口要檢疫的病源微生物、寄生蟲做定性定量分析。

 

電泳圖譜

標(biāo)準(zhǔn)曲線

擴(kuò)增曲線

溶解曲線

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