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核酸濃度檢測(cè)指南(一)
對(duì)于從事 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)相關(guān)研究的科學(xué)家而言, 經(jīng)常需要對(duì)起始核酸/蛋白樣品進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估,未進(jìn)行樣品質(zhì)控將可能導(dǎo)致數(shù)據(jù)差錯(cuò),得出錯(cuò)誤結(jié)論。如 qPCR 等分子生物學(xué)技術(shù)沿用較小體積樣品,因此這些樣品的質(zhì)量至關(guān)重要,且有的應(yīng)用(如: NGS 的文庫(kù)制備)需要進(jìn)行準(zhǔn)確的濃度檢測(cè)以進(jìn)行后續(xù)的均一化。
Micro Drop為一款全光譜波長(zhǎng)(185~910nm)超微量分光光度計(jì),兼具基座和比色皿上樣雙檢測(cè)模式, 適用于更寬濃度范圍的樣品檢測(cè),基座上樣檢測(cè)操作步驟僅需三步(微量移液器加樣—平板電腦控制檢測(cè)—無(wú)絨紙擦拭)即可完成,無(wú)需昂貴的耗材,也無(wú)需進(jìn)行繁瑣的清洗及稀釋步驟,快速。
操作步驟
1、清潔:首先,用移液器滴加去離子水2 -3μl到Micro Drop下部樣品基座,關(guān)閉上臂,確保上層基座與去離子水接觸。停留30秒,用實(shí)驗(yàn)室潔凈無(wú)絨紙將上樣檢測(cè)系統(tǒng)的上部和下部的光學(xué)表面擦拭干凈。
2、打開(kāi)Micro Drop軟件,并選擇核酸應(yīng)用程序。用移液器滴加1μl緩沖液(溶解待測(cè)樣品的液體)至樣品基座光學(xué)表面,選擇“空白檢測(cè)”以執(zhí)行空白測(cè)量。一旦空白測(cè)量完成后,用實(shí)驗(yàn)室潔凈無(wú)絨紙將上樣檢測(cè)系統(tǒng)的上部和下部的光學(xué)表面擦拭干凈。
3、輸入樣品編號(hào),選擇檢測(cè)的樣品類(lèi)型(默認(rèn)的設(shè)定為DNA,消光因子為50)。用移液器滴加樣品0.5-2μl到Micro Drop下部樣品基座,關(guān)閉上臂,選擇“檢測(cè)”,軟件會(huì)自動(dòng)計(jì)算出的核酸濃度和純度比例,3-5秒內(nèi),即可顯示實(shí)驗(yàn)結(jié)果及光譜圖。
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每個(gè)樣品測(cè)量完成后,用實(shí)驗(yàn)室潔凈無(wú)絨紙將上樣檢測(cè)系統(tǒng)的上部和下部的光學(xué)表面擦拭干凈,即可進(jìn)行下一個(gè)樣本的檢測(cè)。(建議連續(xù)使用Micro Drop約30min后再次進(jìn)行一次空白檢測(cè))。所有檢測(cè)結(jié)束后,重復(fù)步驟1,清潔樣品檢測(cè)臺(tái)。
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