移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運動來實現(xiàn)吸液和放液。 在活塞推動下,排出部分空氣, 利用大氣壓吸入液體, 再由活塞推動空氣排出液體。 使用移液器時,配合彈簧的伸縮性特點來操作,可以很好地控制移液的速度和力度。
移液器的操作流程
一、最佳量程選擇與量程設定
1、移液范圍選擇在滿量程的35%到100%時,可以保證最佳的準確性和重復性。選擇合適的量程可以提高1% 移液精度,盡量避免將移液器量程設置為最大值的10%以下。
2、設定齒輪控制的移液器量程時,始終保持「下調」到所需量程,當由小量程調節(jié)到大量程時,旋轉調節(jié)旋鈕到達超過所需量程 1/3 圈處,然后回調到所需量程準確位置,這樣能夠減少機械回沖或者齒輪滑動帶來的影響。
二、浸入的深度和角度
1、將吸頭浸入合適的深度可以提高5%的準確性。吸頭浸入太深會導致吸液偏多,相反,浸入太淺,會吸入空氣。
2、手持移液器的角度也會影響準確性。保證吸液或排液時偏離垂直不超過20°,可以提高2.5%的準確性。
三、潤洗
潤洗是一種快速,簡單的提升移液準確性高達0.2%的方法。為什么呢?因為液體可能會在吸頭內壁上殘留形成液體薄膜,這樣所得的錯誤值將小于理論值。想要獲得更好的移液精度,可以在安裝新吸頭后, 用相同樣品對吸頭進行2~3次潤洗,這樣薄膜會保持相當?shù)暮愣?,從而提高移液的準確性和重復性。
四、吸液
保證吸液的一致性可以提高 5% 的準確性。移取不同樣品時,使用一致的移液節(jié)奏,按壓或釋放按鈕的速度平穩(wěn)一致,到達第一停止點的用力應保持一致??焖倩虿黄椒€(wěn)的吸液會使液體噴濺、產生氣霧、套柄污染以及樣品量損失。
正向洗液:正常的吸液方式,操作時吸液可將按鈕按到第一檔吸液,釋放按鈕。放液時先按下第一檔,打出大部分液體,再按下第二檔,將余液排出。
反向吸液:吸液時將按鈕直接按到第二檔再釋放,這樣會多吸入一些液體,打出液體時只要按到第一檔即可。多吸入的液體可以補償吸頭內部的表面吸附,反向吸液方法適用于甘油等粘性液體。
吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。
為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產生誤差。
移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
五、分液
良好的分液技巧也能提高1%的準確性。分液時用吸頭接觸容器壁時可以獲得更好的一致性。將吸頭的孔口端沿著容器壁向上滑動可以去除孔口端殘留的液體。另外兩種技巧同樣非常適用于水溶(非粘性)液。