ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:①標(biāo)本因素;②試劑因素;③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。1.樣品稀釋 酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性。因此,國外檢測血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴(yán)格按使用說明書操作,如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋,個別用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確,檢測結(jié)果出現(xiàn)問題。2.試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。3.樣品和試劑的混勻 稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。
人核受體相關(guān)蛋白1(NURR1)elisa試劑盒 |
人1型組織纖溶酶原激活物抑制劑(PAIT1)elisa試劑盒 |
人硒蛋白P1(SEPP1)elisa試劑盒 |
人多配體蛋白聚糖1(Syndecan-1)elisa試劑盒 |
人CD20分子抗體(CD20-Ab)elisa試劑盒 |
人空泡毒素相關(guān)蛋白A抗體(VacAAb)elisa試劑盒 |
人尿白三烯(LT)elisa試劑盒 |
人CFP10-ESAT6融合蛋白(CFP10-ESAT6P)elisa試劑盒 |
人羥色胺(serotonin)elisa試劑盒 |
人精氨酸酶(Arg)elisa試劑盒 |
人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)elisa試劑盒 |
人磷脂酰肌酸3-激酶(PI3K)elisa試劑盒 |
人基質(zhì)相互作用分子2(STIM2)elisa試劑盒 |
人低糖基化IgA(UdgIgA)elisa試劑盒 |
人Bcl2;腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)elisa試劑盒 |
人N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)elisa試劑盒 |
人蛋白激酶Cε(PKCε)elisa試劑盒 |
人琥珀酸;丁二酸(SA)elisa試劑盒 |
人轉(zhuǎn)錄因子維甲酸相關(guān)孤兒受體(RORC2)elisa試劑盒 |
人雌激素受體β(ERβ)elisa試劑盒 |
人肽基脯氨酸異構(gòu)酶酶FKBP25(FKBP25)elisa試劑盒 |
人甘氨酸(Gly)elisa試劑盒 |
人可溶性信號素7A(sSEMA7A)elisa試劑盒 |
人前腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(ProBDNF)elisa試劑盒 |
人Trim22分子(TRIM22)elisa試劑盒 |
人蛋白激酶G(PKG)elisa試劑盒 |
人麥醇溶蛋白(Gliadorphin)elisa試劑盒 |
人T復(fù)合體相關(guān)睪丸表達(dá)3(TCTE3)elisa試劑盒 |
人Wnt-10b蛋白(WNT10B)elisa試劑盒 |
人血管內(nèi)皮生長因子抗體(VEGF-Ab)elisa試劑盒 |
人神經(jīng)營養(yǎng)素受體P75(p75NTR)elisa試劑盒 |
人E6AP;p53泛素化(E6AP;p53)elisa試劑盒 |
人納豆激酶(NK)elisa試劑盒 |
人Flag標(biāo)簽(Flag-tag)elisa試劑盒 |
人促甲狀腺激素受體(TSHR )elisa試劑盒 |
人受體相互作用蛋白1(RIP1)elisa試劑盒 |
人丙酰輔酶A(PCoA)elisa試劑盒 |
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