脂肪肝動(dòng)物模型

原理
肝臟是脂質(zhì)代謝的中心器官。在生理狀態(tài)下，肝臟通過攝取從食物中吸收以及由乳糜微?；蛑炯?xì)胞釋放入血的FFA，用于合成TG、TC及磷脂和糖脂，這些合成脂與特異的載脂蛋白結(jié)合而被分泌入血漿，當(dāng)來源于飲食或從脂肪組織中動(dòng)員的FFA急劇增加，超過了肝臟脂質(zhì)代謝動(dòng)力循環(huán)平衡，則脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)開始大量堆積而形成脂肪肝。本脂肪肝模型即通過長期喂食高脂飼料所致。高脂飼料是指在基礎(chǔ)飼料中加入一定比例的脂肪類食物，如5%-20%豬油、1%-10%膽固醇、5%-15%蛋黃粉等。為了促使病變的形成，在高脂飼料中還可添加膽酸鈉或富含不飽和脂肪酸的物質(zhì)如玉米油、魚油等，后者尚易誘致脂肪肝伴炎癥和纖維化。本模型動(dòng)物通常選用大鼠和家兔。模型大鼠在采用高脂飼料持續(xù)飼養(yǎng)2-4周時(shí)可出現(xiàn)高脂血癥，8-12周后肝臟呈中-重度大泡性脂肪變伴轉(zhuǎn)氨酶升高應(yīng)用大鼠建立脂肪肝模型，有飼養(yǎng)方便、抵抗力強(qiáng)、食性與人類相近、模型復(fù)制成功率高等優(yōu)點(diǎn)。
 

特點(diǎn)

模型大鼠血清TC、TG、FFA、AST、ALT升高，肝組織TC、TG、FFA含量增加，AOX表達(dá)增高；肝臟全小葉脂肪變性，屬大囊泡性，并有大囊泡融合形成的脂囊；脂變肝細(xì)胞以中央靜脈周圍zui明顯；100%存在小葉內(nèi)炎癥，以單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤為主，并可見點(diǎn)狀、灶狀、碎屑樣壞死。模型家兔肝臟腫脹，表面呈黃白色，油膩，肝組織有變性（顆粒變性或嗜酸性變）和壞死（溶解及點(diǎn)樣壞死）呈局灶分布并伴淋巴細(xì)胞浸潤，并可見細(xì)胞質(zhì)內(nèi)充滿大量大小不等的圓形脂滴；肝小葉排列紊亂、邊界不清，但未形成假小葉；肝索結(jié)構(gòu)紊亂，纖維組織輕度增生，肝竇和中央靜脈間有紅細(xì)胞堆積。

方法

成年大鼠，每日喂養(yǎng)含2%膽固醇、10%豬油、0.3%膽酸鈉等成分的高脂飼料，連續(xù)8周，或成年家兔，每日喂食含1%膽固醇、10%豬油的高脂飼料40g/kg體重和高膽固醇飼料80mg/kg體重，連續(xù)12周。造模畢，立即抽取全血及摘取肝組織，測定血中總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、游離脂肪酸（FFA）、極低密度脂蛋白（VLDL）、堿性磷酸酶（ALP）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）及肝組織中總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、游離脂肪酸（FFA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）的含量，采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）測定肝組織中酞基輔酶A氧化酶（AOX）的表達(dá)，并對肝臟作組織形態(tài)學(xué)檢查。

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