HCT8/Taxol-LUC-熒光素酶標記操作步驟:
請收到細胞后,在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二) (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
注:1、觀察細胞建議在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否 則不能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。
其他細胞如下: 293-LUC人胚腎細胞-熒光素酶標記 |
293-GFP人胚腎細胞-綠色標記 |
A549-LUC肺腺癌-熒光素酶標記 |
Bel-7402-GFP人肝癌細胞-綠色標記 |
C918-GFP人眼脈絡黑色素瘤細胞-綠色標記 |
CT26.WT-LUC小鼠結(jié)腸癌細胞-熒光素酶標記 |
CT26.WT-GFP小鼠結(jié)腸癌細胞-綠色標記 |
hct116/L-LUC人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株-熒光素酶標記 |
hct116/L-GFP人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株-綠色標記 |
HCT-116-LUC低分化結(jié)腸腺癌-熒光素酶標記 |
HCT-116-GFP低分化結(jié)腸腺癌-綠色標記 |
Hep3B-GFP人肝癌-綠色標記 |
LLC-LUC小鼠肺癌細胞-熒光素酶標記 |
LLC-GFP小鼠肺癌細胞-綠色標記 |
SGC-7901-GFP人胃癌細胞-綠色標記 |
SMMC-7721-GFP人肝癌細胞-綠色標記 |
SW620-LUC人結(jié)腸癌細胞-熒光素酶標記 |
SW620-GFP人結(jié)腸癌細胞-綠色標記 |
ARPE19-GFP人視網(wǎng)膜上皮細胞-綠色標記 |
此外,我公司提供實驗服務如下:
分子生物學
熒光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA設計合成|原位雜交|雙熒光素報告基因|RNA提取|定量PCR|多重PCR|質(zhì)粒構(gòu)建|基因克隆
細胞生物學
細胞培養(yǎng)|MTT檢測|CCK-8檢測|細胞凋亡檢測|細胞周期檢測|siRNA轉(zhuǎn)染|細胞侵襲|細胞遷徙|細胞劃痕
免疫病理學
免疫組化|免疫熒光|Tunel凋亡|western blot|Elisa檢測
動物造模
急慢性結(jié)腸炎模型|肝纖維化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接種腫瘤|非酒精性脂肪肝