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堿性磷酸酶染色
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更新時(shí)間:2024-08-04 21:00:06

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堿性磷酸酶染色
測(cè)定中性粒細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性。當(dāng)粒細(xì)胞內(nèi)有堿性磷酸酶存在時(shí),在緩沖液(pH9.0-9.8)中,可將溫育液中的底物(β甘油磷酸酶)水解為磷酸根和甘油,磷酸根再與硝酸鈣中的Ca2+結(jié)合為磷酸鈣沉淀,此沉淀物再與硝酸鈷、硫酸銨等起一系列化學(xué)反應(yīng),Z后生成不溶性的黑色硫化鈷(CoS),定位于酶活性所在部位。

堿性磷酸酶染色

服務(wù)原理:

測(cè)定中性粒細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性。當(dāng)粒細(xì)胞內(nèi)有堿性磷酸酶存在時(shí),在緩沖液(pH9.0-9.8)中,可將溫育液中的底物(β甘油磷酸酶)水解為磷酸根和甘油,磷酸根再與硝酸鈣中的Ca2+結(jié)合為磷酸鈣沉淀,此沉淀物再與硝酸鈷、硫酸銨等起一系列化學(xué)反應(yīng),zui后生成不溶性的黑色硫化鈷(CoS),定位于酶活性所在部位。
服務(wù)試劑:
1、固定液,包含甲醇90ml,甲醛10ml。
2、溫育液,3.2%β甘油磷酸鈉6ml,0.1M硫酸鎂溶液6ml,2%硝酸鈣9ml,加水至50ml(pH9.8)。固定液及溫育液均放在4℃冰箱保存。
3、2%硝酸鈷溶液。
4、1:80稀釋硫酸銨溶液。
5、2%沙黃溶液。
服務(wù)操作:
1、涂片置固定液(4℃,30s)。
2、水洗數(shù)秒。
3、放入新鮮溫育液,37℃2h。
4、取出后,用水(含有數(shù)滴2%硝酸鈣溶液)沖洗數(shù)秒。
5、侵入2%硝酸鈷5min,然后用水沖洗。
6、侵入新鮮配制的1:80硫酸銨中10s,水洗。
7、2%沙黃水溶液中10s復(fù)染、水洗。待干(也可用瑞氏染液復(fù)染)。
結(jié)果:陽(yáng)性反應(yīng)呈灰黑色至深黑色顆粒狀或片塊狀沉淀,定位于胞漿中。成熟中性粒細(xì)胞有此顆粒。

 

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【本公司合作項(xiàng)目】
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