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石蠟包埋
服務(wù)原理:
石蠟制片法是將材料經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟后包埋在石蠟里面進(jìn)行切片的方法。此法適用范圍廣,制片手段完備,能將材料切成極薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成連續(xù)的片子,這是其它制片法難以達(dá)到的,因此在光學(xué)顯微鏡的制片技術(shù)上它是zui常用的一種方法。除了一些經(jīng)不住石蠟切片法中所應(yīng)用的各種藥劑處理的材料不能應(yīng)用石蠟切片以外,一般的材料都可以用此法制片。
服務(wù)流程:
一.脫水
酒精是制片zui常用的試劑,可與水互溶,酒精的脫水能力較強(qiáng),對(duì)于組織會(huì)有明顯的收縮作用。因此用酒精作為脫水劑時(shí),應(yīng)先從低濃度酒精開(kāi)始,濃度遞增,這樣可以避免組織過(guò)度收縮。目前有些脫水機(jī)具備震搖功能,這樣可加快脫水進(jìn)程。
二. 透 明
組織脫水后,要經(jīng)過(guò)浸蠟透明的過(guò)程,使石蠟滲透到組織中去,達(dá)到包埋的支持作用。由于脫水劑如酒精與石蠟不溶,因此必須使用一種與酒精和石蠟都互溶的媒劑將酒精置換掉,待酒精*被*取代后,組織成透明狀態(tài),即透明。
三. 浸 蠟
透明后即可將組織浸入溶解的石蠟進(jìn)行浸蠟,石蠟逐漸浸入組織間隙,取代透明劑,這一過(guò)程叫浸蠟。石蠟的質(zhì)量和熔度與切片質(zhì)量密切相關(guān),所用的石蠟有一定的熔點(diǎn)和硬度。
四. 包 埋
包埋,就是將浸蠟的組織塊從溶解的石蠟中取出,放入充滿熔融石蠟的包埋框內(nèi),使組織和包埋劑相熔并迅速冷卻的過(guò)程。包埋劑凝固后,加強(qiáng)了組織的硬度和韌度,從而利于切片。
五. 石蠟切片
在包埋以后,就可進(jìn)行切片。包埋好的石蠟塊裝在切片機(jī)上,進(jìn)行固著整修,通常切片厚度為3-5um,注意切片速度不宜太快,防止切片機(jī)震動(dòng)厲害引起切片厚薄不均勻。切好的切片須貼附于載玻片上,一般采用撈片法,但切片常有細(xì)小的橫紋,必須經(jīng)展平后才能貼附,否則影響染色和觀察。
組織切片是無(wú)色透明的,必須進(jìn)行染色后才能觀察到各種微細(xì)結(jié)構(gòu),染色后的切片須再次經(jīng)過(guò)脫水、透明、中性樹脂封片,待封藏劑凝固后便成為一張成功的石蠟切片。
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