細胞成骨誘導

成骨誘導培養(yǎng)液配備與誘導操作： 
1、準備含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液； 
2、在備好的α-MEM培養(yǎng)液中添加50μM 抗壞血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松； 
3、準備6孔培養(yǎng)板，將P4細胞按照5×103個/平方厘米的規(guī)格接種于原始α-MEM培養(yǎng)液中； 
4、待細胞長至基本融合后，更換上述制備完成的成骨誘導培養(yǎng)液； 
5、每三天換液一次，細胞長至7天時進行堿性磷酸酶染色； 
6、二十八天后再進行礦化結節(jié)的茜素紅染色。 
素紅染色方法介紹： 
1、去除細胞當前使用培養(yǎng)液，使用PBS清洗兩次； 
2、使用10%甲醛室溫固定15分鐘，完成后使用重蒸餾水沖洗兩次； 
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素紅染色液，室溫孵育20min并輕微振蕩； 
4、清除掉沒有*結合的染料，用重蒸餾水漂洗并振蕩5min重復4次； 
5、傾斜放置2min,吸取多余的重蒸餾水；倒置顯微鏡觀察拍照記錄。 

實驗注意事項：
客戶提供：
細胞種類和誘導分化細胞類型。

收費標準/服務周期/提供結果：
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