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hct116/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株
特性:
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下*好是在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項:
1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請及時與我們。
hct116/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株
其他服務(wù)項目:
服務(wù)領(lǐng)域 | 服務(wù)內(nèi)容 |
分子生物學(xué)實驗 | 熒光定量PCR、慢病毒/腺病毒包裝、化學(xué)合成序列、全基因合成、原位雜交、甲基化 |
細(xì)胞生物學(xué)實驗 | 細(xì)胞分離和鑒定、細(xì)胞耐藥株構(gòu)建、細(xì)胞共培養(yǎng)、外泌體提取、穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建 |
蛋白相關(guān)形態(tài)實驗 | 蛋白表達(dá)檢測:Western blot;免疫組化 (IHC)、免疫組化芯片、免疫熒光(IF)、激光共聚焦拍片、 Elisa檢測 |
動物模型實驗 | 成瘤實驗:裸鼠成瘤實驗、原位接種成瘤實驗 |
DNA/RNA/蛋白相互作用研究實驗 | 雙熒光素酶驗證實驗、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)(ChIP)、RIP技術(shù)(RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀)、EMSA實驗、RNA pull down |
高通量分析實驗 | 高通量測序、蛋白質(zhì)組學(xué) |
其他服務(wù)項目:
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