Waters XSelect色譜柱——難分離共流出物的克星

XSelect色譜柱

XSelect色譜柱設(shè)計(jì)用于滿(mǎn)足分析化學(xué)家對(duì)方法開(kāi)發(fā)所需要的各種不同鍵合相，將特別難分離的共流出物分開(kāi)。

■ 專(zhuān)為選擇性而設(shè)計(jì)，為難分離的色譜峰改善分離效果；

■ 兼顧分離與純化所需，確保色譜柱的樣品載量；

■ 適用于快速方法開(kāi)發(fā)，減少方法開(kāi)發(fā)過(guò)程所需的時(shí)間與成本。

我們發(fā)現(xiàn)：在相同的分離機(jī)理下，色譜填料的基質(zhì)屬性，對(duì)于選擇性的影響最大，其次才是不同鍵合相的影響。如果只改變填料基質(zhì)或是鍵合相，都不足以提供選擇性的最大變化。如果能將填料基質(zhì)與鍵合相組合起來(lái)，并確保批次重現(xiàn)性，就能為分析化學(xué)家提供更有力、也是更可靠的分析方法開(kāi)發(fā)工具。

XSelect鍵合相列表I (表面帶電雜化CSH)

XSelect鍵合相列表II (高強(qiáng)度硅膠HSS)

反相和正相兼容性

XSelect HSS CN是XSelect HPLC色譜柱系列產(chǎn)品中較多樣化的固定相。正如類(lèi)固醇分析圖例所示，該色譜柱可被成功用于正相和反相分離?；衔铮?/span>1、氫化可的松，2、皮質(zhì)酮，3、β-雌二醇，4、孕酮。

用于改善選擇性的含氟固定相

含氟固定相為常規(guī)C18提供了互補(bǔ)的色譜分離選擇性，特別是當(dāng)需要分析堿性或平面芳香族化合物時(shí)。XSelect HSS PFP和CSH氟苯基色譜柱具有相同配體，但是不同的顆粒基體提供了不同的保留特性。

化合物：1、氨基吡嗪，2、吲哚洛爾，3、奎寧，4、拉貝洛爾，5、維拉帕米，6、地爾硫卓，7、阿米ti林

芳香族化合物保留特性

苯基固定相通過(guò)π-π作用力提高了與平面芳香族化合物的相互作用。與氟苯基色譜柱相比，相比與那些次級(jí)的Lewis堿相互作用力而言XSelect CSH苯基色譜柱更多強(qiáng)調(diào)反相作用。

顆?；w選擇性

不同的顆粒基體可給不同的化合物提供不同的選擇性和保留特性。XSelect HSS和CSH顆粒是兩種基體，可提供酸性、堿性和中性化合物的不同選擇性。

改善堿性化合物的選擇性

XSelect HSS C18 SB設(shè)計(jì)用來(lái)改善低pH流動(dòng)相條件下極性堿性化合物的保留。

CSH C18：為堿性分析物提供優(yōu)異峰形與載量

HSS T3：顯著增強(qiáng)對(duì)極性分子的反相保留能力

XSelect制備柱

XSelect制備柱家族，包括基于表面帶電雜化CSH顆粒技術(shù)的OBD制備柱(制備柱內(nèi)徑可達(dá)50 mmid)，以及基于高強(qiáng)度硅膠HSS顆粒技術(shù)的半制備柱(內(nèi)徑達(dá)10 mmid)?？膳c相應(yīng)的HPLC分析柱、ACQUITY UPLC柱保持化學(xué)選擇性的*一致性，確保方法在不同分離平臺(tái)上的無(wú)憂(yōu)轉(zhuǎn)換。關(guān)于各鍵合相品種介紹，請(qǐng)參見(jiàn)XSelect HPLC分析柱章節(jié)。

其中，XSelect CSH色譜柱為制備型分離技術(shù)帶來(lái)了革命性變化。其優(yōu)勢(shì)集中體現(xiàn)在：

■ 為堿性目標(biāo)物提供了優(yōu)異的峰形與載量

■ 不再依賴(lài)于離子對(duì)試劑，允許使用甲酸體系條件，便于樣品處理回收

■ 不再依賴(lài)于離子對(duì)試劑，允許使用甲酸體系條件，便于質(zhì)譜引導(dǎo)制備

使用含TFA和甲酸的苯海拉明(峰1)和特非那定(峰2)進(jìn)行的制備型載載研究。譜圖1和譜圖2使用通用C18色譜柱對(duì)比了使用TFA和甲酸流動(dòng)相的影響。盡管兩個(gè)結(jié)構(gòu)都顯示質(zhì)量過(guò)載，但使用甲酸流動(dòng)相時(shí)出現(xiàn)更明顯的峰形變差。但對(duì)比傳統(tǒng)色譜柱與XSelect CSH C18色譜柱使用0.1%甲酸流動(dòng)相條件(譜圖2和譜圖3)時(shí)，XSelect CSH C18色譜柱色譜峰形明顯改善。該載量研究結(jié)果被擴(kuò)展至使用XSelect CSH C18 OBD 19×100 mm色譜柱(譜圖4)的制備型分離。

從UPLC直接放大到制備

在整個(gè)流程中使用CSH技術(shù)：用ACQUITY UPLC CSH柱和UPLC技術(shù)進(jìn)行快速方法開(kāi)發(fā)，然后轉(zhuǎn)換到制備級(jí)別的XSelect OBD制備柱進(jìn)行分離純化，最后使用ACQUITY UPLC CSH柱和UPLC技術(shù)對(duì)收集流份進(jìn)行純度測(cè)量與確認(rèn)。