ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色譜柱的入門指南

  每根ACQUITY CSH色譜柱的色譜柱包裝盒或eCord智能芯片中都隨附COA報告和性能測試報告。COA報告為是針對填料的批次測試報告，包括填料批號、填料顆粒鍵和前和鍵合后的分析數(shù)據(jù)、測試結(jié)果和所用的測試條件。性能測試色譜圖提供每根色譜柱的以下信息：批號、色譜柱序列號、USP塔板數(shù)、USP拖尾因子、保留因子以及色譜條件。這些數(shù)據(jù)應(yīng)妥善保存，以備將來參考。

a. eCord安裝

（可能并非所有色譜柱配置都適用。）

  eCord智能芯片按鈕專用于ACQUITY UPLC和ACQUITY Arc™系統(tǒng)，需要裝在儀器柱溫箱模塊的側(cè)面。eCord按鈕經(jīng)過磁化處理，不需要專門的安裝操作。有關(guān)eCord智能芯片功能的更多信息，請參閱本維護(hù)和使用手冊第V節(jié)。

b. 色譜柱安裝

（帶或不帶VanGuard FIT保護(hù)柱）

  注：在處理ACQUITY CSH色譜柱和任何化學(xué)品之前，請咨詢您的安全主管部門和/或參照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)，使用適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)裝備。

  ACQUITY CSH色譜柱出廠時保存于100%乙腈中。下述步驟中給出的流速適用于內(nèi)徑2.1 mm的色譜柱。

1. 灌注泵系統(tǒng)，排出含緩沖鹽的流動相，然后將色譜柱的入口端連接至進(jìn)樣器出口。

2. 通過將泵流速設(shè)置為0.1 mL/min，并且在至少5 min增加至0.5 mL/min，用100%有機流動相（甲醇或乙腈）沖洗色譜柱。

3. 當(dāng)流動相可從色譜柱出口均勻流出時，停流速，并將色譜柱出口連接至檢測器。這能防止氣泡進(jìn)入檢測系統(tǒng)。

4. 按照步驟2所述逐漸增加流速。

5. 一旦柱壓和基線達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)，即可繼續(xù)進(jìn)行下一部分操作。

c. 色譜柱平衡

  在更換為其他流動相體系之前，務(wù)必確保流動相的兼容性。請用至少10倍柱體積的流動相平衡色譜柱（色譜柱體積請參見表1）。當(dāng)色譜柱達(dá)到恒定背壓時，可認(rèn)為該柱已達(dá)到熱力學(xué)平衡。

表1.不同規(guī)格色譜柱柱體積(mL)（乘以10得到?jīng)_洗色譜柱所用的流動相體積）

  為了避免流動相緩沖鹽在色譜柱或系統(tǒng)中發(fā)生析出，請使用5倍柱體積的水/有機溶劑混合溶液沖洗色譜柱，其中有機溶劑比例應(yīng)與所需緩沖鹽流動相中的有機溶劑比例相同或更低。（例如，引入60%甲醇/40%緩沖鹽流動相之前，應(yīng)使用60%甲醇水溶液沖洗色譜柱和系統(tǒng)。）

d. 初始柱效測定

1. 使用色譜柱之前，需要先進(jìn)行柱效測試。這項測試可包括 ：

a. 您所在實驗室常用的混合標(biāo)準(zhǔn)品，和/或

b. Waters柱性能測試報告中測試柱效所用的標(biāo)準(zhǔn)品。

  注：如果采用(b)項的分析物進(jìn)行柱效測試，在等度條件下測得的柱效可能低于沃特世色譜柱性能報告中所示的柱效。這種情況是正常的。為了盡可能減小系統(tǒng)體積，沃特世的等度色譜柱測試系統(tǒng)進(jìn)行了相應(yīng)的改進(jìn)。這對于色譜柱填充質(zhì)量的考察相當(dāng)具有挑戰(zhàn)性，可確保色譜柱被最好地裝填。

  這些經(jīng)過改造的特殊測試系統(tǒng)不再具有商業(yè)可行性，方法的靈活性亦受限，只能用于等度色譜柱測試。

2. 測定理論塔板數(shù)(N)，并定期對比該數(shù)值。

3. 按預(yù)定的時間間隔進(jìn)行重復(fù)測試，跟蹤色譜柱性能隨時間的變化情況。所得柱效結(jié)果可能會有微小差異，這可能是由于連接質(zhì)量、運行環(huán)境、系統(tǒng)電子設(shè)備、試劑質(zhì)量、色譜柱條

件和操作員技術(shù)等方面存在差異所致。

e. 色譜柱QR碼

  色譜柱標(biāo)簽上的快速參考卡(QR)碼可提供色譜柱專有信息（即色譜柱的唯一標(biāo)識符 - P/N和序列號），這些信息按照廣泛采用的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行編碼。

1. 可使用任何能掃描QR碼的設(shè)備進(jìn)行掃描（即使用智能手機和平板電腦的內(nèi)置攝像頭應(yīng)用程序進(jìn)行掃描）。

2. QR碼直接鏈接至waters.com的色譜柱信息中心。

3. 獲取關(guān)于色譜柱的技術(shù)信息和專業(yè)信息（即COA報告和應(yīng)用紀(jì)要）。

f. VanGuard保護(hù)柱

  VanGuard™保護(hù)柱專門用于ACQUITY UPLC色譜柱。VanGuard保護(hù)柱是2.1 mm（內(nèi)徑）× 5 mm（長）的保護(hù)柱設(shè)備，專用于ACQUITY UPLC系統(tǒng)。VanGuard保護(hù)柱所使用的填料和篩板與內(nèi)徑2.1 mm的ACQUITY UPLC CSH色譜柱相同。VanGuard保護(hù)柱可直接連接至ACQUITY UPLC CSH色譜柱的入口端。

  注：為了確保VanGuard保護(hù)柱的連接無空隙且無滲漏，在出廠時未將保護(hù)柱的箍環(huán)和錐箍進(jìn)行永久性固定。取下將這兩個部件固定至保護(hù)柱管路的O形圈時，必須謹(jǐn)慎操作。

安裝說明

1. 從包裝箱中取出VanGuard保護(hù)柱，然后取下塑料塞頭。

2. 調(diào)整保護(hù)柱方向使其外接頭朝上，小心取下在運輸期間用于固定箍環(huán)和錐箍的橡膠O形圈（箍環(huán)和錐箍尚未永久性固定）。

3. 使ACQUITY UPLC CSH色譜柱垂直于工作臺表面，且色譜柱入口朝下（色譜柱出口朝上）。

4. 將VanGuard保護(hù)柱從下方插入ACQUITY UPLC CSH色譜柱入口，并用手?jǐn)Q緊（箍環(huán)和錐箍尚未永久性固定）。

5. 將VanGuard保護(hù)柱推入色譜柱入口后，將組裝好的色譜柱和保護(hù)柱翻轉(zhuǎn)180°，使保護(hù)柱位于上方。

6. 如圖所示（圖1），將兩個5/16英寸扳手分別置于ACQUITY UPLC CSH色譜柱的平坦部分和VanGuard保護(hù)柱六角螺母（外接頭）處，然后擰緊。

7. 擰緊1/4圈，固定箍環(huán)和錐箍。

8. 松開接頭并檢查錐箍深度，確保錐箍完全固定。經(jīng)適當(dāng)固定后，錐箍深度將與ACQUITY UPLC系統(tǒng)中其他連接相似。

9. 重新連接保護(hù)柱，使流動相流經(jīng)保護(hù)柱，檢查滲漏情況。

g. VanGuard FIT保護(hù)柱

VanGuard FIT保護(hù)柱專門用于ACQUITY Premier色譜柱。

  對于帶VanGuard FIT保護(hù)柱的ACQUITY Premier色譜柱，可以使用兩個3/8英寸扳手更換VanGuard FIT保護(hù)柱。只需用扳手咬合住保護(hù)柱和色譜柱末端螺母的平坦部分，然后逆時針轉(zhuǎn)動（見圖2），即可拆下VanGuard FIT保護(hù)柱，然后按照實驗室規(guī)范合理棄置。

  接下來可以使用VanGuard FIT保護(hù)柱更換棄置的保護(hù)柱。沿順時針方向用手?jǐn)Q緊新的保護(hù)柱，再用兩個3/8英寸扳手?jǐn)Q緊。正確密封的位置不應(yīng)超過手?jǐn)Q緊處的1/4圈。