客戶：小刀，我之前有聽過你的siRNA文庫(kù)講座，還挺感興趣的
客戶：但是我們實(shí)驗(yàn)室沒有高通量?jī)x器，也可以做siRNA文庫(kù)篩選嗎？會(huì)不會(huì)太麻煩？
DAO：不會(huì)很麻煩，小幾十個(gè)基因的篩選排槍就能搞定，高通量?jī)x器一般適用于幾百、幾千或幾萬個(gè)基因的篩選

客戶：之前沒做過siRNA篩選，我有點(diǎn)怕我操作不好
DAO：這個(gè)不用太擔(dān)心，基本的轉(zhuǎn)染操作和單基因一致，只不過通常是用96孔細(xì)胞板進(jìn)行，所以需要多些細(xì)心和耐心

客戶：好的，那我可以試試看
客戶：對(duì)了，你講座中提到的成品文庫(kù)，我看了下，這些基因家族分類和我想要研究的方向不能夠完mei匹配呢
DAO：你說的是這些亞庫(kù)嘛？
 
DAO：這個(gè)問題不大，圖中所有文庫(kù)的基因列表我都有，你可以看看你的研究方向和哪套庫(kù)靠的上，然后挑選自己喜歡的基因進(jìn)行定制。又或者你自己有想要研究的一些基因，可以直接發(fā)我，畢竟只要有5個(gè)基因就能定制文庫(kù)了，價(jià)格還劃算

客戶：能定制還蠻不錯(cuò)的，那我來看看能不能湊些基因出來給你
客戶：但是定制的規(guī)格、產(chǎn)品形式又是什么樣的？是不是和成品不一樣啊？
DAO：基本是一樣的，但是定制更靈活：規(guī)格上有0.1, 0.25, 0.5, 1, 2 nmol 5種可選，siRNA你可以選擇4條分裝的，也可以選擇SMARTpool形式的

客戶：等等等，什么叫4條分裝，SMARTpool又是什么？
DAO：哈哈，講座沒認(rèn)真聽吧，是這樣的，每個(gè)基因我們會(huì)提供4條不同的siRNA，4條分裝就是每條siRNA單獨(dú)放1個(gè)孔里，那SMARTpool就是把4條siRNA預(yù)混后共同放在1個(gè)孔里

客戶：那我要怎么選啊？哪種更合適呢？
DAO：做多個(gè)基因篩選的話，我是更建議選SMARTpool的，這樣你的轉(zhuǎn)染工作量就減少了3/4，而且SMARTpool沉默效果更好，畢竟4條不同的siRNA共同發(fā)揮作用，大哥不行還有二哥、三哥和四哥呢

客戶：那沉默效率怎樣？有沒有做過驗(yàn)證啊？萬一效果不好怎么辦？
DAO：這個(gè)可以放心，所有的siRNA出廠前都有做過驗(yàn)證，而且是有沉默效率保障的，保證每個(gè)基因?qū)?yīng)的4條siRNA中至少有3條在mRNA水平上有≥75%的沉默效率，如果效果不好，提供陰陽性對(duì)照、siRNA的qPCR數(shù)據(jù)，廠家是會(huì)賠付的

客戶：OKK，那這個(gè)規(guī)格我咋選呢，我是想買個(gè)0.1nmol的，但是具體能做幾次篩選我有點(diǎn)慌？
DAO：和我想到一起去了，如果只是利用文庫(kù)做一下基因的初篩，那0.1nmol就很夠用了
DAO：關(guān)于能做幾次篩選，這個(gè)取決于你最終轉(zhuǎn)染時(shí)siRNA的使用終濃度了。以96孔板篩選，25nM終濃度，每個(gè)基因3個(gè)復(fù)孔為例，大概可以支持個(gè)10次篩選左右

客戶：這樣啊，那0.1nmol確實(shí)夠用了，篩到以后，我再單獨(dú)購(gòu)買大規(guī)格的siRNA就是了，沒必要篩選的時(shí)候就買那么多，不劃算
DAO：對(duì)的，就是這個(gè)意思

客戶：行，那我了解了，我現(xiàn)在就去找找基因去，你把泛素化集合相關(guān)的基因列表發(fā)我，我看看選一些，再把我手頭上有的基因列一列，到時(shí)發(fā)你
DAO：好噠，這是基因列表，請(qǐng)查收
 
客戶：謝謝