免疫組織化學（IHC）是一種非常有價值的工具，用于檢測、定位和量化保存組織中的抗原，以達到研究和診斷的目的。這種方法因其方便、可靠和多功能性而被廣泛用于診斷和研究。在IHC中，抗原抗體復合物可通過熒光檢測顯現(xiàn)出來。不過，它們通常是通過光顯微鏡來觀察的，而不是使用顏色信號，這種方法被稱為顯色檢測。與免疫熒光技術(shù)相比，顯色IHC的優(yōu)勢在于通過蘇木精復染，特異抗原周圍的組織形態(tài)清晰可見。染色IHC標記的結(jié)果以半定量方式報告，具有重要的診斷和預后意義，特別是在區(qū)分良性和惡性病變方面。

圖1. 小鼠抗CD44抗體（克隆號SFF-304）和兔抗Ki-67抗體（克隆號MIB-1）與MULTIVIEW® PLUS（mouse-HRP/rabbit-AP）試劑盒（ENZ-KIT181-0150，Enzo Life）配合使用，進行多重免疫組化染色，蘇木精用作復染劑。

原位雜交

原位雜交（ISH）是一種du特的分子分析方法，因為它能在顯微鏡下精確定位中期染色體涂片、細胞和組織中的DNA、mRNA和microRNA等核酸。1969年8月，兩個獨立的研究小組首ci對該方法進行了描述。原則上，ISH包括：(a)細胞或組織樣本的固定和預處理，以方式保存目標核酸；(b)標記探針通過互補堿基配對與目標雜交；最后，(c)檢測標記，以便在顯微鏡下觀察雜交。與IHC相似，探針的檢測可通過顯色或熒光技術(shù)實現(xiàn)，分別稱為顯色原位雜交（ISH）或熒光原位雜交（FISH）。FISH已成為對可能最終導致癌癥發(fā)生的基因畸變進行分子分析的一種特別強大的工具。

圖2. Nick Translation DNA Labeling System 2.0（ENZ-GEN111-0050，Enzo Life）用Orange 552 dUTP（ENZ-42842，Enzo Life）標記TP53的BAC DNA 探針，用Green 496 dUTP（ENZ-42831，Enzo Life）標記中心粒17的BAC DNA 探針。標記的探針與中期染色體涂片雜交。(圖片來源于盧茲腫瘤大學研究所）

IHC在癌癥中的應用

IHC 是一種利用單克隆和多克隆抗體檢測組織切片中特定抗原的方法，是癌癥研究人員和外科病理診斷醫(yī)師的一個非常強大的工具。通過IHC，可以確定相關(guān)抗原在健康和疾病狀態(tài)下的組織分布。IHC被廣泛應用于癌癥研究和診斷，因為特定的腫瘤抗原只有在某些癌癥類型中才會重新表達或上調(diào)。因此，IHC在研究和病理學中發(fā)揮著重要作用，尤其是在腫瘤病理學、神經(jīng)bing理學和血液病理學等亞專業(yè)領(lǐng)域。雖然組織的基本組織學檢查仍被認為是有用和必要的步驟，但IHC能提供更多更詳細的見解。IHC可用于癌癥研究中的各種應用，如腫瘤標志物的鑒定和監(jiān)測、腫瘤診斷（尤其是來源不明的腫瘤）、腫瘤預后以及預測乳腺癌和前列腺癌的治療反應。

圖3. 宮頸組織先用抗Ki-67抗體（小鼠）染色，然后用生物素偶聯(lián)的抗小鼠二抗染色，再用SAVIEW® PLUS HRP Reagent（ENZ-ACC102-0150，Enzo Life） 染色。

ISH在癌癥中的應用

FISH是一種功能強大的技術(shù)，主要用于檢測染色體異常。FISH的靈敏度高、特異性強、檢測速度快，使其成為一項舉足輕重的細胞遺傳學技術(shù)，在血液惡性腫瘤和實體瘤的研究和診斷方面都取得了重大進展。從醫(yī)學角度看，F(xiàn)ISH可用于檢測基因畸變，如基因融合、非整倍體或染色體缺失。它還可用于監(jiān)測畸變的進展或鑒定新的致癌基因?，F(xiàn)在，病毒感染在某些癌癥類型的發(fā)展中的重要性已被廣泛證實，ISH也為人類乳頭瘤病毒（HPV）感染相關(guān)癌癥的診斷和研究提供了一個強大的工具。Enzo Life于1986年開發(fā)出*款用于ISH檢測的非放射性HPV探針，可用于監(jiān)測細胞和組織樣本中病毒載量。

圖4. 用PATHO-GENE® HPV 16/18/31/33/51（ENZ-32882，Enzo Life）篩查宮頸組織，然后用SAVIEW® PLUS HRP Reagent（ENZ-ACC102-0150，Enzo Life）進行篩查。

EnzoLife提供多樣的HPV病毒、經(jīng)典的腫瘤靶點（EGFR）、GADPH以及泛素化等Ready-to-use型的RNA原位雜交探針。

部分相關(guān)產(chǎn)品推薦：

除此之外，如果沒有找到合適的商品化RNA探針，也可以對想要檢測到靶點自行定制特異性的RNA探針（如圖5）。

圖5. 原位雜交探針的定制

下表是可用于IHC、FISH或ISH自己定制探針產(chǎn)品的相關(guān)推薦：

關(guān)于Enzo Life

Enzo Life做為分子診斷領(lǐng)域的*者，可提供包括基因、蛋白、細胞、組織全層面的標記和檢測試劑，如原位雜交探針、活細胞熒光探針、組化試劑盒、小分子化學文庫等。除了科研領(lǐng)域外，Enzo Life還給提供多樣的生物工藝質(zhì)量檢測試劑盒（如Protein A殘留檢測盒，HCP殘留檢測等 ）