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人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學(xué)研究的工具
閱讀：671 發(fā)布時間：2024-1-3
人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的實驗工具，其原理基于酶聯(lián)免疫吸附實驗，抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子，可以識別并結(jié)合特定的抗原，形成抗原-抗體復(fù)合物。Elisa試劑盒通常包含有特異性與目標(biāo)抗原結(jié)合的抗體。分為直接Elisa、間接Elisa、競爭Elisa和間接競爭Elisa等多種類型。
人elisa試劑盒的步驟如下：
1.固定抗原：在試驗板表面上固定抗原。通常將抗原溶液加入試驗孔并孵育，使抗原與試驗板表面結(jié)合。
2.阻斷：通過加入一種非特異性蛋白(如牛血清蛋白)來封閉試驗孔表面的未被固定的地方，以防止非特異性結(jié)合。
3.添加樣品：加入含有可能存在目標(biāo)抗原的樣品，樣品中的目標(biāo)抗原與試板上的固定抗原結(jié)合。
4.洗滌：洗滌試板以去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)。
5.加入初級抗體：加入與目標(biāo)抗原結(jié)合的初級抗體。初級抗體可以是直接標(biāo)記的，也可以是未標(biāo)記的。
6.洗滌：洗滌試板以去除未結(jié)合的初級抗體。
7.加入二級抗體：加入與初級抗體結(jié)合的二級抗體。二級抗體一般是與酶結(jié)合的抗體，如辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase，HRP)標(biāo)記的抗體。
8.洗滌：洗滌試板以去除未結(jié)合的二級抗體。
9.加入底物：加入一種酶底物，通常為染色底物。該底物可以與酶發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生可見的顏色變化。
10.反應(yīng)終止：加入酶反應(yīng)終止劑，停止底物的反應(yīng)，并保留底物的顏色變化。
11.測量：使用光譜儀或讀板儀器測量試驗孔中底物的顏色強度，該強度與目標(biāo)抗原的濃度相關(guān)。
通過測量底物的顏色強度，可以確定樣品中目標(biāo)抗原的含量。人elisa試劑盒的靈敏度高，可以檢測低濃度的抗原，并具有分析簡單、高通量的優(yōu)點，因此被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷和科學(xué)研究領(lǐng)域。