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超微量分光光度計(jì)的原理及使用方法介紹
閱讀:2001 發(fā)布時(shí)間:2023-3-6
超微量分光光度計(jì)是一種應(yīng)用于分析和檢測(cè)微小分子濃度的儀器,主要用于分析和檢測(cè)生物分子和化學(xué)分子的含量和質(zhì)量。其工作原理基于分子吸收不同波長(zhǎng)光線的能力,通過(guò)光線通過(guò)樣品引起的吸收程度來(lái)確定溶液的濃度。以下將詳細(xì)介紹其工作原理和使用方法。
一、工作原理
1.光源:超微量分光光度計(jì)使用的是可見(jiàn)光和紫外線的光源,普遍采用鹵素?zé)?,?yáng)極氧化鋁、聚酰亞胺和鎢激發(fā)燈等。
2.分光儀:分光儀通過(guò)將可見(jiàn)光和紫外線分解為不同的波長(zhǎng),根據(jù)不同波長(zhǎng)的吸收情況來(lái)分析樣品的濃度。分光儀使用的是一組設(shè)計(jì)好的光柵來(lái)分離光線,每個(gè)光柵能夠分離一定范圍內(nèi)的波長(zhǎng)。
3.樣品池:樣品池是在分光儀中放置樣品的地方,通常采用石英或玻璃材質(zhì)制成。
4.探測(cè)器:探測(cè)器是最重要的裝置之一,負(fù)責(zé)接受樣品池中吸收或透射的光,并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。探測(cè)器通常采用光電二極管或光電multiplier管。
二、使用方法
1.校準(zhǔn)超微量分光光度計(jì):在使用前,需要對(duì)光度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn),以確保其讀數(shù)準(zhǔn)確。校準(zhǔn)過(guò)程中,需要使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),使用前需要將樣品池清洗干凈,在樣品池中加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)溶液,設(shè)置波長(zhǎng),記錄吸收測(cè)量值,并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
2.準(zhǔn)備樣品:將待測(cè)樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,將溶液放入潔凈的樣品池中。注意,樣品?yīng)該盡可能稀釋,以提高精度。
3.設(shè)置波長(zhǎng):選擇波長(zhǎng),將分光儀設(shè)置為樣品溶液所吸收的波長(zhǎng)。
4.吸收測(cè)量:將樣品池放入分光光度計(jì)中,使其測(cè)量樣品的吸收值。在吸收測(cè)量過(guò)程中,要避免任何突然的振動(dòng),以及其他外來(lái)因素的影響,如電磁干擾等。
5.數(shù)據(jù)分析:將數(shù)據(jù)整理到工作文檔中,進(jìn)行進(jìn)一步的比較和分析。