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低溫冷凍離心機分離效果受離心介質(zhì)溫度和pH的影響
閱讀:1718發(fā)布時間:2019-12-17
低溫冷凍離心機分離效果受離心介質(zhì)溫度和pH的影響
低溫冷凍離心機分離技術(shù)是分子生物學研究中*的手段?;蚱蔚姆蛛x、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實驗中,都離不開低溫離心技術(shù),因此低溫冷凍離心機已成為分子生物學研究中必需的重要工具。
低溫冷凍離心機通過轉(zhuǎn)頭繞軸高速旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的強大離心力,根據(jù)不同物質(zhì)在離心場中沉降速度的差異,使樣品中不同性質(zhì)的物質(zhì)分離,以滿足科研人員對實驗樣品的分析、分離要求。的分離效果與很多因素有關(guān),不可否認離心力和離心時間這兩個是非常重要的。一般來講,離心力越大,則離心效果越好。而在離心時間上,則是離心時間越長,離心效果越好。不過,需要知道的是,同等離心力下,當離心時間達到某些數(shù)值后,離心效果不會再提升,則是會保持不變。在實際操作中,以下條件也至關(guān)重要。
對于生物樣品,為了防止待分離物質(zhì)的凝集、變性和失活,除了在離心介質(zhì)的選擇方面加以注意外,還必須控制好溫度及介質(zhì)溶液的pH值等離心條件。
離心溫度一般控制在4℃左右,對于某些熱穩(wěn)定性較好的生物樣本,離心過程可在室溫下進行。
但由于超速或高速離心時,轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)會發(fā)熱從而引起溫度升高導致樣本損失。故必須采用冷凍系統(tǒng),使溫度穩(wěn)定在一定范圍內(nèi)。
離心介質(zhì)溶液的pH值應處于樣本可以穩(wěn)定存在的pH范圍內(nèi),必要時可采用緩沖液。
另外,溶液過酸或過堿有可能引起轉(zhuǎn)子和離心機的其他部件的腐蝕,應盡量避免與部件直接接觸,并在接觸后及時清洗。
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